畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2008年
8期
1-5
,共5页
刘刚%ZHANG Yan-ming%李肖梁%WEI Wei%帅江冰%FANG Wei-huan
劉剛%ZHANG Yan-ming%李肖樑%WEI Wei%帥江冰%FANG Wei-huan
류강%ZHANG Yan-ming%리초량%WEI Wei%수강빙%FANG Wei-huan
犬瘟热病毒%H基因%遗传进化分析%克隆表达%免疫转印
犬瘟熱病毒%H基因%遺傳進化分析%剋隆錶達%免疫轉印
견온열병독%H기인%유전진화분석%극륭표체%면역전인
以临床疑似犬瘟热病犬外周血总RNA为模板,采用RT.PCR方法扩增犬瘟热病毒(CDV)血凝素(H)基因.序列测定和分析表明该病料犬瘟热病毒H基因序列与国内其他地区分离到的毒株同源性较高(94.6%～99.2%),而与Onderstepoort株、Convac株等疫苗毒株的同源性较低(90.4%～91.2%).分子遗传进化分析显示所有毒株可分为7个大的分支,且各分支间具有一定的地域性,其中待检病料中CDV与大多数中国分离株一样处于Ⅰ型.进一步以H全基因为模板,截短表达其3'端816 bp、459 bp两个片段,并克隆入原核表达载体pET30a进行表达.结果显示它们分别能表达大小约为36.4 ku和22.2 ku的融合蛋白.免疫转印表明该纯化蛋白均可与犬瘟热病毒抗血清发生阳性反应,说明重组蛋白具备抗原性,可用于进一步的血清学研究.
以臨床疑似犬瘟熱病犬外週血總RNA為模闆,採用RT.PCR方法擴增犬瘟熱病毒(CDV)血凝素(H)基因.序列測定和分析錶明該病料犬瘟熱病毒H基因序列與國內其他地區分離到的毒株同源性較高(94.6%～99.2%),而與Onderstepoort株、Convac株等疫苗毒株的同源性較低(90.4%～91.2%).分子遺傳進化分析顯示所有毒株可分為7箇大的分支,且各分支間具有一定的地域性,其中待檢病料中CDV與大多數中國分離株一樣處于Ⅰ型.進一步以H全基因為模闆,截短錶達其3'耑816 bp、459 bp兩箇片段,併剋隆入原覈錶達載體pET30a進行錶達.結果顯示它們分彆能錶達大小約為36.4 ku和22.2 ku的融閤蛋白.免疫轉印錶明該純化蛋白均可與犬瘟熱病毒抗血清髮生暘性反應,說明重組蛋白具備抗原性,可用于進一步的血清學研究.
이림상의사견온열병견외주혈총RNA위모판,채용RT.PCR방법확증견온열병독(CDV)혈응소(H)기인.서렬측정화분석표명해병료견온열병독H기인서렬여국내기타지구분리도적독주동원성교고(94.6%～99.2%),이여Onderstepoort주、Convac주등역묘독주적동원성교저(90.4%～91.2%).분자유전진화분석현시소유독주가분위7개대적분지,차각분지간구유일정적지역성,기중대검병료중CDV여대다수중국분리주일양처우Ⅰ형.진일보이H전기인위모판,절단표체기3'단816 bp、459 bp량개편단,병극륭입원핵표체재체pET30a진행표체.결과현시타문분별능표체대소약위36.4 ku화22.2 ku적융합단백.면역전인표명해순화단백균가여견온열병독항혈청발생양성반응,설명중조단백구비항원성,가용우진일보적혈청학연구.
