西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2009年
3期
366-369
,共4页
陈庆海%匡红%府伟灵%黄君富%华兴%汪广杰
陳慶海%劻紅%府偉靈%黃君富%華興%汪廣傑
진경해%광홍%부위령%황군부%화흥%왕엄걸
耐乙胺丁醇embB基因%303密码子点突变%分子信标%荧光分光光度计
耐乙胺丁醇embB基因%303密碼子點突變%分子信標%熒光分光光度計
내을알정순embB기인%303밀마자점돌변%분자신표%형광분광광도계
目的 设计针对结核杆茼耐乙胺丁醇embB303codon的分子信标,尝试运用荧光分光光度计直接观测液相中分子信标与embB3303codon扩增产物杂交后的荧光信号,从而检出该位点突变.方法 运用软件Beacon designer设计embB基因包含303eodon的分子信标,应用荧光分光光度计检潮embB303codon扩增片段与探针杂交后荧光信号,同时对扩增产物测序并作比较.结果 通过荧光分光光度计现潮到结核标准株及耐乙胺丁醇embB303codonPCR产物与分子信标杂交后荧光信号存在显著差异;33株耐乙胺丁醇组与10株H37RV标准株对照组荧光信号强度比较,耐乙胺丁畔组embB3303codon突变捡出率为6%,测序法突变检出率为6%.结论 embB303codon点突变不是结核杆茵耐乙胺丁醇的主要原因;应用荧光分先光度计直接检测液相杂交荧光具有简单、灵敏等优点,分子信标技术可以有效检测单碱基靶点突变.
目的 設計針對結覈桿茼耐乙胺丁醇embB303codon的分子信標,嘗試運用熒光分光光度計直接觀測液相中分子信標與embB3303codon擴增產物雜交後的熒光信號,從而檢齣該位點突變.方法 運用軟件Beacon designer設計embB基因包含303eodon的分子信標,應用熒光分光光度計檢潮embB303codon擴增片段與探針雜交後熒光信號,同時對擴增產物測序併作比較.結果 通過熒光分光光度計現潮到結覈標準株及耐乙胺丁醇embB303codonPCR產物與分子信標雜交後熒光信號存在顯著差異;33株耐乙胺丁醇組與10株H37RV標準株對照組熒光信號彊度比較,耐乙胺丁畔組embB3303codon突變撿齣率為6%,測序法突變檢齣率為6%.結論 embB303codon點突變不是結覈桿茵耐乙胺丁醇的主要原因;應用熒光分先光度計直接檢測液相雜交熒光具有簡單、靈敏等優點,分子信標技術可以有效檢測單堿基靶點突變.
목적 설계침대결핵간동내을알정순embB303codon적분자신표,상시운용형광분광광도계직접관측액상중분자신표여embB3303codon확증산물잡교후적형광신호,종이검출해위점돌변.방법 운용연건Beacon designer설계embB기인포함303eodon적분자신표,응용형광분광광도계검조embB303codon확증편단여탐침잡교후형광신호,동시대확증산물측서병작비교.결과 통과형광분광광도계현조도결핵표준주급내을알정순embB303codonPCR산물여분자신표잡교후형광신호존재현저차이;33주내을알정순조여10주H37RV표준주대조조형광신호강도비교,내을알정반조embB3303codon돌변검출솔위6%,측서법돌변검출솔위6%.결론 embB303codon점돌변불시결핵간인내을알정순적주요원인;응용형광분선광도계직접검측액상잡교형광구유간단、령민등우점,분자신표기술가이유효검측단감기파점돌변.
