中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
49期
9160-9164
,共5页
郭伟%马艳%段礼府%毕晓娟%刘立中
郭偉%馬豔%段禮府%畢曉娟%劉立中
곽위%마염%단례부%필효연%류립중
豚鼠%脂肪间充质干细胞%分化%耳科%神经分化
豚鼠%脂肪間充質榦細胞%分化%耳科%神經分化
돈서%지방간충질간세포%분화%이과%신경분화
背景:目前关于耳科干细胞研究的动物实验大多是将其他动物种属的干细胞用于豚鼠模型,而对于豚鼠本身来源的干细胞研究报道极少.目的:观察豚鼠脂肪间充质干细胞成骨、成脂肪、成神经细胞分化的潜能,并探讨其应用于耳科实验的可能.方法:取豚鼠脂肪,分离脂肪间充质细胞培养至第3代,检测第1~10天细胞增殖吸光度值;流式细胞仪检测细胞的免疫表型;并行成骨细胞诱导、成脂肪细胞诱导、成神经细胞诱导及鉴定.结果与结论:脂肪间充质细胞增殖的生长曲线近似"S"形,传代后经过3 d的潜伏期,4 d进入对数生长期,8 d进入平台期;锥虫蓝染色细胞拒染率94%~98%,从P0~P5细胞的总产量扩增了约3 600倍;其细胞免疫表型CD29表达率86.3%,CD44表达率55.5%,CD45表达率为0.4%.成骨细胞诱导后经特异性染色可见矿化结节形成;成脂肪细胞诱导后经油红O染色胞浆内可见脂质滴;成神经细胞诱导后细胞形态与神经细胞类似,Nestin、GFAP、NF200染色均呈阳性.提示豚鼠脂肪间充质细胞在体外易于分离、培养及扩增,具有间充质干细胞的"干性",是一种适用于耳科实验研究的理想干细胞.
揹景:目前關于耳科榦細胞研究的動物實驗大多是將其他動物種屬的榦細胞用于豚鼠模型,而對于豚鼠本身來源的榦細胞研究報道極少.目的:觀察豚鼠脂肪間充質榦細胞成骨、成脂肪、成神經細胞分化的潛能,併探討其應用于耳科實驗的可能.方法:取豚鼠脂肪,分離脂肪間充質細胞培養至第3代,檢測第1~10天細胞增殖吸光度值;流式細胞儀檢測細胞的免疫錶型;併行成骨細胞誘導、成脂肪細胞誘導、成神經細胞誘導及鑒定.結果與結論:脂肪間充質細胞增殖的生長麯線近似"S"形,傳代後經過3 d的潛伏期,4 d進入對數生長期,8 d進入平檯期;錐蟲藍染色細胞拒染率94%~98%,從P0~P5細胞的總產量擴增瞭約3 600倍;其細胞免疫錶型CD29錶達率86.3%,CD44錶達率55.5%,CD45錶達率為0.4%.成骨細胞誘導後經特異性染色可見礦化結節形成;成脂肪細胞誘導後經油紅O染色胞漿內可見脂質滴;成神經細胞誘導後細胞形態與神經細胞類似,Nestin、GFAP、NF200染色均呈暘性.提示豚鼠脂肪間充質細胞在體外易于分離、培養及擴增,具有間充質榦細胞的"榦性",是一種適用于耳科實驗研究的理想榦細胞.
배경:목전관우이과간세포연구적동물실험대다시장기타동물충속적간세포용우돈서모형,이대우돈서본신래원적간세포연구보도겁소.목적:관찰돈서지방간충질간세포성골、성지방、성신경세포분화적잠능,병탐토기응용우이과실험적가능.방법:취돈서지방,분리지방간충질세포배양지제3대,검측제1~10천세포증식흡광도치;류식세포의검측세포적면역표형;병행성골세포유도、성지방세포유도、성신경세포유도급감정.결과여결론:지방간충질세포증식적생장곡선근사"S"형,전대후경과3 d적잠복기,4 d진입대수생장기,8 d진입평태기;추충람염색세포거염솔94%~98%,종P0~P5세포적총산량확증료약3 600배;기세포면역표형CD29표체솔86.3%,CD44표체솔55.5%,CD45표체솔위0.4%.성골세포유도후경특이성염색가견광화결절형성;성지방세포유도후경유홍O염색포장내가견지질적;성신경세포유도후세포형태여신경세포유사,Nestin、GFAP、NF200염색균정양성.제시돈서지방간충질세포재체외역우분리、배양급확증,구유간충질간세포적"간성",시일충괄용우이과실험연구적이상간세포.