安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
7期
3873-3876
,共4页
柴化建%赵海泉%张丽君%罗焕亮
柴化建%趙海泉%張麗君%囉煥亮
시화건%조해천%장려군%라환량
植原体%Imp基因%表达条件%正交试验设计
植原體%Imp基因%錶達條件%正交試驗設計
식원체%Imp기인%표체조건%정교시험설계
[目的]为提高植原体膜蛋白Imp基因在E.coli BL21(DE3)中的表达量,优化Imp基因的原核表达条件.[方法]通过设计正交试验,考察不同的培养条件对工程菌E.coli BL21(DE3)-pET-28a(+)-Imp的影响.在获得最佳培养条件的基础上考察不同诱导条件对Imp蛋白表达量的影响.利用SDS-PAGE和Gene Tools凝胶分析软件分析融合蛋白Imp的表达量.[结果]表达条件优化结果表明,最佳培养条件为:温度37℃,pH 7.0,装液量20%,振荡速度200 r/min;最佳诱导条件为:温度37℃,起始OD600≈1.5,IPTG终浓度0.1mmol/L,诱导培养时间6h.[结论]在最佳条件下Imp表达量达70.98 mg/L,确定了Imp融合蛋白在大肠杆菌的优化表达条件.
[目的]為提高植原體膜蛋白Imp基因在E.coli BL21(DE3)中的錶達量,優化Imp基因的原覈錶達條件.[方法]通過設計正交試驗,攷察不同的培養條件對工程菌E.coli BL21(DE3)-pET-28a(+)-Imp的影響.在穫得最佳培養條件的基礎上攷察不同誘導條件對Imp蛋白錶達量的影響.利用SDS-PAGE和Gene Tools凝膠分析軟件分析融閤蛋白Imp的錶達量.[結果]錶達條件優化結果錶明,最佳培養條件為:溫度37℃,pH 7.0,裝液量20%,振盪速度200 r/min;最佳誘導條件為:溫度37℃,起始OD600≈1.5,IPTG終濃度0.1mmol/L,誘導培養時間6h.[結論]在最佳條件下Imp錶達量達70.98 mg/L,確定瞭Imp融閤蛋白在大腸桿菌的優化錶達條件.
[목적]위제고식원체막단백Imp기인재E.coli BL21(DE3)중적표체량,우화Imp기인적원핵표체조건.[방법]통과설계정교시험,고찰불동적배양조건대공정균E.coli BL21(DE3)-pET-28a(+)-Imp적영향.재획득최가배양조건적기출상고찰불동유도조건대Imp단백표체량적영향.이용SDS-PAGE화Gene Tools응효분석연건분석융합단백Imp적표체량.[결과]표체조건우화결과표명,최가배양조건위:온도37℃,pH 7.0,장액량20%,진탕속도200 r/min;최가유도조건위:온도37℃,기시OD600≈1.5,IPTG종농도0.1mmol/L,유도배양시간6h.[결론]재최가조건하Imp표체량체70.98 mg/L,학정료Imp융합단백재대장간균적우화표체조건.