中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2011年
25期
224-228
,共5页
秦碧霞%蔡健和%魏源文%莫磊兴%陆秀红%刘志明
秦碧霞%蔡健和%魏源文%莫磊興%陸秀紅%劉誌明
진벽하%채건화%위원문%막뢰흥%륙수홍%류지명
高梁花叶病毒%甘蔗黄叶病毒%RT-PCR
高樑花葉病毒%甘蔗黃葉病毒%RT-PCR
고량화협병독%감자황협병독%RT-PCR
根据甘蔗花叶病毒(sugarcane mosaic virus,SCMV)、高粱花叶病毒(sorghum mosaic virus,SrMV)和甘蔗黄叶病毒(sugarcane yellow leaf virus,SCYLV)外壳蛋白(CP)基因序列分别设计合成3对特异引物SCMV-F/R、SrMV-F/R和SCYLV-F/R,以表现花叶和黄叶复合症状的甘蔗叶片总RNA为模板,分别进行3种病毒单一RT-PCR检测,在SrMV和SCYLV特异引物RT-PCR反应体系中分别扩增到约850bp和630 bp特异性片段.序列测定及同源性比对结果显示,850bp片段测序所得序列与浙江象山、临平和余杭SrMV分离物(GenBank登录号分别为AJ310194、AJ310195和AJ310198)对应序列同源性95％,630bp片段测序所得序列与广东、广西、福建SCYLV分离物(GenB ank登录号分别为GU190165、GU190162、GU190159)对应序列同源性99％,表明该样品同时感染SrMV和SCYLV.在此基础上建立同时检测SrMV和SCYLV的一步双重RT-PCR体系,可检测1×10-6g病叶组织中的病毒,田间样品检测效果良好.
根據甘蔗花葉病毒(sugarcane mosaic virus,SCMV)、高粱花葉病毒(sorghum mosaic virus,SrMV)和甘蔗黃葉病毒(sugarcane yellow leaf virus,SCYLV)外殼蛋白(CP)基因序列分彆設計閤成3對特異引物SCMV-F/R、SrMV-F/R和SCYLV-F/R,以錶現花葉和黃葉複閤癥狀的甘蔗葉片總RNA為模闆,分彆進行3種病毒單一RT-PCR檢測,在SrMV和SCYLV特異引物RT-PCR反應體繫中分彆擴增到約850bp和630 bp特異性片段.序列測定及同源性比對結果顯示,850bp片段測序所得序列與浙江象山、臨平和餘杭SrMV分離物(GenBank登錄號分彆為AJ310194、AJ310195和AJ310198)對應序列同源性95％,630bp片段測序所得序列與廣東、廣西、福建SCYLV分離物(GenB ank登錄號分彆為GU190165、GU190162、GU190159)對應序列同源性99％,錶明該樣品同時感染SrMV和SCYLV.在此基礎上建立同時檢測SrMV和SCYLV的一步雙重RT-PCR體繫,可檢測1×10-6g病葉組織中的病毒,田間樣品檢測效果良好.
근거감자화협병독(sugarcane mosaic virus,SCMV)、고량화협병독(sorghum mosaic virus,SrMV)화감자황협병독(sugarcane yellow leaf virus,SCYLV)외각단백(CP)기인서렬분별설계합성3대특이인물SCMV-F/R、SrMV-F/R화SCYLV-F/R,이표현화협화황협복합증상적감자협편총RNA위모판,분별진행3충병독단일RT-PCR검측,재SrMV화SCYLV특이인물RT-PCR반응체계중분별확증도약850bp화630 bp특이성편단.서렬측정급동원성비대결과현시,850bp편단측서소득서렬여절강상산、림평화여항SrMV분리물(GenBank등록호분별위AJ310194、AJ310195화AJ310198)대응서렬동원성95％,630bp편단측서소득서렬여엄동、엄서、복건SCYLV분리물(GenB ank등록호분별위GU190165、GU190162、GU190159)대응서렬동원성99％,표명해양품동시감염SrMV화SCYLV.재차기출상건립동시검측SrMV화SCYLV적일보쌍중RT-PCR체계,가검측1×10-6g병협조직중적병독,전간양품검측효과량호.
