中华老年医学杂志
中華老年醫學雜誌
중화노년의학잡지
Chinese Journal of Geriatrics
2004年
12期
879-882
,共4页
刘莉%张小进%姜苏蓉%高翔%丁国宪%程蕴琳
劉莉%張小進%薑囌蓉%高翔%丁國憲%程蘊琳
류리%장소진%강소용%고상%정국헌%정온림
热休克蛋白质类%基因%转染%氧化性应激%脱噬作用
熱休剋蛋白質類%基因%轉染%氧化性應激%脫噬作用
열휴극단백질류%기인%전염%양화성응격%탈서작용
目的克隆和重组人心肌热休克蛋白27(HSP27)基因,观察HSP27高表达对大鼠心肌细胞氧化应激的影响. 方法将RT- PCR获得的人心肌HSP27基因全长cDNA,重组入质粒载体pCDNA3.1+.将重组体pCDNA3.1+/HSP27转染大鼠心肌细胞系H9c2,经G418选择性培养获得稳定转染细胞系;观察HSP27高表达对H2O2诱导的乳酸脱氢酶(LDH)释放和细胞凋亡的影响. 结果 (1)pCDNA3.1+/HSP27在293T和H9c2中表达良好;(2)0、100、250、500、1000 μmol/L H2O2引起的LDH释放,在HSP27高表达组和野生型组分别为0.396±0.017和0.390±0.009、0.437±0.014和0.416±0.015、0.471±0.018和0.417±0.009、0.505±0.030和0.657±0.022、0.547±0.027和0.661±0.011(均为P<0.001);(3)150 μmol/L H2O2 诱导的细胞凋亡在HSP27高表达和野生型组分别为总细胞数的(10.693±1.122)%和(4.027±1.628)%,P<0.01. 结论人心肌HSP27基因被成功克隆和重组,其在大鼠心肌细胞系H9c2的高度表达显著保护了该细胞的过氧化损伤.
目的剋隆和重組人心肌熱休剋蛋白27(HSP27)基因,觀察HSP27高錶達對大鼠心肌細胞氧化應激的影響. 方法將RT- PCR穫得的人心肌HSP27基因全長cDNA,重組入質粒載體pCDNA3.1+.將重組體pCDNA3.1+/HSP27轉染大鼠心肌細胞繫H9c2,經G418選擇性培養穫得穩定轉染細胞繫;觀察HSP27高錶達對H2O2誘導的乳痠脫氫酶(LDH)釋放和細胞凋亡的影響. 結果 (1)pCDNA3.1+/HSP27在293T和H9c2中錶達良好;(2)0、100、250、500、1000 μmol/L H2O2引起的LDH釋放,在HSP27高錶達組和野生型組分彆為0.396±0.017和0.390±0.009、0.437±0.014和0.416±0.015、0.471±0.018和0.417±0.009、0.505±0.030和0.657±0.022、0.547±0.027和0.661±0.011(均為P<0.001);(3)150 μmol/L H2O2 誘導的細胞凋亡在HSP27高錶達和野生型組分彆為總細胞數的(10.693±1.122)%和(4.027±1.628)%,P<0.01. 結論人心肌HSP27基因被成功剋隆和重組,其在大鼠心肌細胞繫H9c2的高度錶達顯著保護瞭該細胞的過氧化損傷.
목적극륭화중조인심기열휴극단백27(HSP27)기인,관찰HSP27고표체대대서심기세포양화응격적영향. 방법장RT- PCR획득적인심기HSP27기인전장cDNA,중조입질립재체pCDNA3.1+.장중조체pCDNA3.1+/HSP27전염대서심기세포계H9c2,경G418선택성배양획득은정전염세포계;관찰HSP27고표체대H2O2유도적유산탈경매(LDH)석방화세포조망적영향. 결과 (1)pCDNA3.1+/HSP27재293T화H9c2중표체량호;(2)0、100、250、500、1000 μmol/L H2O2인기적LDH석방,재HSP27고표체조화야생형조분별위0.396±0.017화0.390±0.009、0.437±0.014화0.416±0.015、0.471±0.018화0.417±0.009、0.505±0.030화0.657±0.022、0.547±0.027화0.661±0.011(균위P<0.001);(3)150 μmol/L H2O2 유도적세포조망재HSP27고표체화야생형조분별위총세포수적(10.693±1.122)%화(4.027±1.628)%,P<0.01. 결론인심기HSP27기인피성공극륭화중조,기재대서심기세포계H9c2적고도표체현저보호료해세포적과양화손상.
