中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2004年
4期
320-324
,共5页
郭佳%姚相杰%郑从义%方呈祥%屈三甫%李信墙%李卫云
郭佳%姚相傑%鄭從義%方呈祥%屈三甫%李信牆%李衛雲
곽가%요상걸%정종의%방정상%굴삼보%리신장%리위운
HCV全基因组%克隆%转染细胞体系%重组痘病毒
HCV全基因組%剋隆%轉染細胞體繫%重組痘病毒
HCV전기인조%극륭%전염세포체계%중조두병독
采用一种含有HCV全基因组和噬菌体T7启动子和终止子序列的载体(pHCV)转染Vero-E6细胞,随后感染高效表达T7 RNA聚合酶的重组痘病毒(vTF7-3),通过vTF7-3的辅助作用,使Vero-E6细胞高效增殖HCV病毒体,建立了一种新的HCV体外细胞培养体系.RT-PCR、荧光定量PCR检测转染细胞裂解液中HCV滴度的结果显示:pHCV转染细胞内HCV基因拷贝达107-108/mL,同时有HCV正链RNA合成;免疫印迹显示该培养体系中有HCV结构蛋白、非结构蛋白的表达;pHCV转染细胞经透射电镜观察,可见清晰的HCV病毒体,直径在40-50nm.这一新体系的初步建立,为研究HCV的复制机制、制备HCV疫苗和研发抗病毒药物奠定了基础.
採用一種含有HCV全基因組和噬菌體T7啟動子和終止子序列的載體(pHCV)轉染Vero-E6細胞,隨後感染高效錶達T7 RNA聚閤酶的重組痘病毒(vTF7-3),通過vTF7-3的輔助作用,使Vero-E6細胞高效增殖HCV病毒體,建立瞭一種新的HCV體外細胞培養體繫.RT-PCR、熒光定量PCR檢測轉染細胞裂解液中HCV滴度的結果顯示:pHCV轉染細胞內HCV基因拷貝達107-108/mL,同時有HCV正鏈RNA閤成;免疫印跡顯示該培養體繫中有HCV結構蛋白、非結構蛋白的錶達;pHCV轉染細胞經透射電鏡觀察,可見清晰的HCV病毒體,直徑在40-50nm.這一新體繫的初步建立,為研究HCV的複製機製、製備HCV疫苗和研髮抗病毒藥物奠定瞭基礎.
채용일충함유HCV전기인조화서균체T7계동자화종지자서렬적재체(pHCV)전염Vero-E6세포,수후감염고효표체T7 RNA취합매적중조두병독(vTF7-3),통과vTF7-3적보조작용,사Vero-E6세포고효증식HCV병독체,건립료일충신적HCV체외세포배양체계.RT-PCR、형광정량PCR검측전염세포렬해액중HCV적도적결과현시:pHCV전염세포내HCV기인고패체107-108/mL,동시유HCV정련RNA합성;면역인적현시해배양체계중유HCV결구단백、비결구단백적표체;pHCV전염세포경투사전경관찰,가견청석적HCV병독체,직경재40-50nm.저일신체계적초보건립,위연구HCV적복제궤제、제비HCV역묘화연발항병독약물전정료기출.
