生殖医学杂志
生殖醫學雜誌
생식의학잡지
JOURNAL OF REPRODUCTIVE MEDICINE
2005年
6期
346-351
,共6页
成毅明%石心泉%于和鸣%吴燕婉%贾孟春
成毅明%石心泉%于和鳴%吳燕婉%賈孟春
성의명%석심천%우화명%오연완%가맹춘
热休克70-2蛋白%双向电泳%精子发生%质谱分析%免疫组织化学
熱休剋70-2蛋白%雙嚮電泳%精子髮生%質譜分析%免疫組織化學
열휴극70-2단백%쌍향전영%정자발생%질보분석%면역조직화학
目的运用蛋白质组学方法,寻找大鼠精子发生相关蛋白质,找到目标蛋白质后,进一步用免疫组织化学方法做定位研究.方法用重力沉降法(STAPUT法)从9 d龄雄性大鼠睾丸中分离出A型精原细胞,从成年的雄性大鼠睾丸中分离出粗线期精母细胞、圆形精子细胞.分别提取这3种细胞的总蛋白质,进行双向电泳.对所得双向电泳凝胶扫描,分析并找出差异蛋白质.对挑选出的差异蛋白质做质谱分析,发现在这3种不同细胞的表达上有明显差异的蛋白.进一步做睾丸免疫组织化学组织定位、定量研究.结果双向电泳结果显示,HSP70-2在粗线期精母细胞、圆形精子细胞中表达量较高,在A型精原细胞则表达量极少.HSP70-2在粗线期精母细胞中表达量最大.用HSP70-2抗体对大鼠睾丸组织切片行免疫组织化学研究,发现粗线期精母细胞、Sertoli细胞、Leydig细胞有阳性颗粒反应.HSP70-2主要表达于细胞质. 结论HSP70-2在精子发生过程中有明显的差异表达,推测其对精子发生起重要调节作用.
目的運用蛋白質組學方法,尋找大鼠精子髮生相關蛋白質,找到目標蛋白質後,進一步用免疫組織化學方法做定位研究.方法用重力沉降法(STAPUT法)從9 d齡雄性大鼠睪汍中分離齣A型精原細胞,從成年的雄性大鼠睪汍中分離齣粗線期精母細胞、圓形精子細胞.分彆提取這3種細胞的總蛋白質,進行雙嚮電泳.對所得雙嚮電泳凝膠掃描,分析併找齣差異蛋白質.對挑選齣的差異蛋白質做質譜分析,髮現在這3種不同細胞的錶達上有明顯差異的蛋白.進一步做睪汍免疫組織化學組織定位、定量研究.結果雙嚮電泳結果顯示,HSP70-2在粗線期精母細胞、圓形精子細胞中錶達量較高,在A型精原細胞則錶達量極少.HSP70-2在粗線期精母細胞中錶達量最大.用HSP70-2抗體對大鼠睪汍組織切片行免疫組織化學研究,髮現粗線期精母細胞、Sertoli細胞、Leydig細胞有暘性顆粒反應.HSP70-2主要錶達于細胞質. 結論HSP70-2在精子髮生過程中有明顯的差異錶達,推測其對精子髮生起重要調節作用.
목적운용단백질조학방법,심조대서정자발생상관단백질,조도목표단백질후,진일보용면역조직화학방법주정위연구.방법용중력침강법(STAPUT법)종9 d령웅성대서고환중분리출A형정원세포,종성년적웅성대서고환중분리출조선기정모세포、원형정자세포.분별제취저3충세포적총단백질,진행쌍향전영.대소득쌍향전영응효소묘,분석병조출차이단백질.대도선출적차이단백질주질보분석,발현재저3충불동세포적표체상유명현차이적단백.진일보주고환면역조직화학조직정위、정량연구.결과쌍향전영결과현시,HSP70-2재조선기정모세포、원형정자세포중표체량교고,재A형정원세포칙표체량겁소.HSP70-2재조선기정모세포중표체량최대.용HSP70-2항체대대서고환조직절편행면역조직화학연구,발현조선기정모세포、Sertoli세포、Leydig세포유양성과립반응.HSP70-2주요표체우세포질. 결론HSP70-2재정자발생과정중유명현적차이표체,추측기대정자발생기중요조절작용.
