南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2010年
2期
45-50
,共6页
吴志明%董文琦%党志红%潘文亮%谢晓亮%温春秀%陈劲枫
吳誌明%董文琦%黨誌紅%潘文亮%謝曉亮%溫春秀%陳勁楓
오지명%동문기%당지홍%반문량%사효량%온춘수%진경풍
半夏凝集素%基因克隆%转基因烟草%抗性%桃蚜
半夏凝集素%基因剋隆%轉基因煙草%抗性%桃蚜
반하응집소%기인극륭%전기인연초%항성%도아
研究了半夏凝集素(Pinellia terrtata agglutinin,PTA)基因对桃蚜(Myzus persicae)的抗性.从半夏幼叶中提取总RNA,采用RT-PCR法分离克隆出PTA-1基因cDNA片段,该基因在GenBank中登录号为DQ092435.序列分析表明:该cDNA片段全长为810 bp,编码269个氨基酸组成的蛋白,具有单子叶植物甘露糖凝集素基因家族的特征,含有3个由4个氨基酸(QDNY)组成的甘露糖专一结合位点,与报道的天南星科凝集素基因氨基酸序列的同源性在72.7%～92.9%.构建了35S启动子控制下的PTA 1基因的植物表达载体pBI121-PTA 1,该载体含有抗卡那霉素的选择标记基因(not Ⅱ),利用根癌农杆菌介导法转化烟草获得抗卡那霉素的植株.PCR和半定量RT-PCR分析表明:PTA 1基因已经整合到植物基因组中并在转录水平上得到了有效表达.抗蚜虫鉴定表明:转基因植株有效地抑制了蚜虫的群体增长率,平均抑制率达77.02%,表明该基因对同翅目害虫的抗虫基因工程有重要的应用价值.
研究瞭半夏凝集素(Pinellia terrtata agglutinin,PTA)基因對桃蚜(Myzus persicae)的抗性.從半夏幼葉中提取總RNA,採用RT-PCR法分離剋隆齣PTA-1基因cDNA片段,該基因在GenBank中登錄號為DQ092435.序列分析錶明:該cDNA片段全長為810 bp,編碼269箇氨基痠組成的蛋白,具有單子葉植物甘露糖凝集素基因傢族的特徵,含有3箇由4箇氨基痠(QDNY)組成的甘露糖專一結閤位點,與報道的天南星科凝集素基因氨基痠序列的同源性在72.7%～92.9%.構建瞭35S啟動子控製下的PTA 1基因的植物錶達載體pBI121-PTA 1,該載體含有抗卡那黴素的選擇標記基因(not Ⅱ),利用根癌農桿菌介導法轉化煙草穫得抗卡那黴素的植株.PCR和半定量RT-PCR分析錶明:PTA 1基因已經整閤到植物基因組中併在轉錄水平上得到瞭有效錶達.抗蚜蟲鑒定錶明:轉基因植株有效地抑製瞭蚜蟲的群體增長率,平均抑製率達77.02%,錶明該基因對同翅目害蟲的抗蟲基因工程有重要的應用價值.
연구료반하응집소(Pinellia terrtata agglutinin,PTA)기인대도아(Myzus persicae)적항성.종반하유협중제취총RNA,채용RT-PCR법분리극륭출PTA-1기인cDNA편단,해기인재GenBank중등록호위DQ092435.서렬분석표명:해cDNA편단전장위810 bp,편마269개안기산조성적단백,구유단자협식물감로당응집소기인가족적특정,함유3개유4개안기산(QDNY)조성적감로당전일결합위점,여보도적천남성과응집소기인안기산서렬적동원성재72.7%～92.9%.구건료35S계동자공제하적PTA 1기인적식물표체재체pBI121-PTA 1,해재체함유항잡나매소적선택표기기인(not Ⅱ),이용근암농간균개도법전화연초획득항잡나매소적식주.PCR화반정량RT-PCR분석표명:PTA 1기인이경정합도식물기인조중병재전록수평상득도료유효표체.항아충감정표명:전기인식주유효지억제료아충적군체증장솔,평균억제솔체77.02%,표명해기인대동시목해충적항충기인공정유중요적응용개치.
