CAJ | 학술논문

从已建立的天山雪莲cDNA文库中随机挑取单克隆,采用通用引物M13扩增出基因序列并测序,然后将该序列在GenBank中进行比对,根据该序列设计特异引物进行PCR,最终获得了冷调节蛋白基因siCOR的完整开放读码框(ORF)；构建植物表达载体,通过农杆菌介导法获得转基因烟草,用RT-PCR对转化烟草进行鉴定,收取种子后筛选出纯合的T3株系,并通过冷冻胁迫进行抗寒性分析.结果表明:(1)siCOR大小661 bp,与禾本科植物粳稻的冷调节蛋白基因一致性最高(65.04％).(2)与野生型植株相比,转siCOR基因烟草均叶片浓绿、无分支侧芽,生长快；在冷冻胁迫条件下,转siCOR基因的烟草叶片相对含水量、PSⅡ相对量子产率降低幅度、相对电导率和丙二醛含量的升高幅度均低于野生型烟草植株,而且转siCOR基因烟草植株叶片出现萎蔫症状的时间较迟、程度较轻,受到的伤害也较轻.研究发现,在冷冻胁迫条件下,转siCOR基因烟草植株表现出良好的生理和生长优势,显示出了较强的抗寒特征.
종이건립적천산설련cDNA문고중수궤도취단극륭,채용통용인물M13확증출기인서렬병측서,연후장해서렬재GenBank중진행비대,근거해서렬설계특이인물진행PCR,최종획득료랭조절단백기인siCOR적완정개방독마광(ORF)；구건식물표체재체,통과농간균개도법획득전기인연초,용RT-PCR대전화연초진행감정,수취충자후사선출순합적T3주계,병통과냉동협박진행항한성분석.결과표명:(1)siCOR대소661 bp,여화본과식물갱도적랭조절단백기인일치성최고(65.04％).(2)여야생형식주상비,전siCOR기인연초균협편농록、무분지측아,생장쾌；재냉동협박조건하,전siCOR기인적연초협편상대함수량、PSⅡ상대양자산솔강저폭도、상대전도솔화병이철함량적승고폭도균저우야생형연초식주,이차전siCOR기인연초식주협편출현위언증상적시간교지、정도교경,수도적상해야교경.연구발현,재냉동협박조건하,전siCOR기인연초식주표현출량호적생리화생장우세,현시출료교강적항한특정.