安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
10期
5786-5788
,共3页
NrfA基因%原核表达%多克隆抗体
NrfA基因%原覈錶達%多剋隆抗體
NrfA기인%원핵표체%다극륭항체
[目的]克隆大肠杆菌NrfA基因,构建pET-28a(+ )-NrfA表达载体,制备相应的多克隆抗体并对其进行鉴定.[方法]以大肠杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增得到NrfA基因编码区,构建pET-28a(+ )-NrfA表达载体；经IPTG诱导表达并纯化重组蛋白；再免疫新西兰雄兔,制备多克隆抗体;用ELISA方法检测抗体的效价,Western Blotting检测抗体的特异性.[结果]构建的表达载体pET-28a(+)-NrfA在大肠杆菌中诱导后可高效表达NrfA蛋白；免疫获得的多克隆抗体用ELISA检测,其效价为1∶204 900;经Western Blotting分析,抗体的特异性较好.[结论]成功克隆大肠杆菌的NrfA基因,并构建了其表达载体,制备的NrfA多克隆抗体具有较高的效价和良好的特异性,为研究细菌有关NrfA奠定了基础.
[目的]剋隆大腸桿菌NrfA基因,構建pET-28a(+ )-NrfA錶達載體,製備相應的多剋隆抗體併對其進行鑒定.[方法]以大腸桿菌基因組DNA為模闆,PCR擴增得到NrfA基因編碼區,構建pET-28a(+ )-NrfA錶達載體；經IPTG誘導錶達併純化重組蛋白；再免疫新西蘭雄兔,製備多剋隆抗體;用ELISA方法檢測抗體的效價,Western Blotting檢測抗體的特異性.[結果]構建的錶達載體pET-28a(+)-NrfA在大腸桿菌中誘導後可高效錶達NrfA蛋白；免疫穫得的多剋隆抗體用ELISA檢測,其效價為1∶204 900;經Western Blotting分析,抗體的特異性較好.[結論]成功剋隆大腸桿菌的NrfA基因,併構建瞭其錶達載體,製備的NrfA多剋隆抗體具有較高的效價和良好的特異性,為研究細菌有關NrfA奠定瞭基礎.
[목적]극륭대장간균NrfA기인,구건pET-28a(+ )-NrfA표체재체,제비상응적다극륭항체병대기진행감정.[방법]이대장간균기인조DNA위모판,PCR확증득도NrfA기인편마구,구건pET-28a(+ )-NrfA표체재체；경IPTG유도표체병순화중조단백；재면역신서란웅토,제비다극륭항체;용ELISA방법검측항체적효개,Western Blotting검측항체적특이성.[결과]구건적표체재체pET-28a(+)-NrfA재대장간균중유도후가고효표체NrfA단백；면역획득적다극륭항체용ELISA검측,기효개위1∶204 900;경Western Blotting분석,항체적특이성교호.[결론]성공극륭대장간균적NrfA기인,병구건료기표체재체,제비적NrfA다극륭항체구유교고적효개화량호적특이성,위연구세균유관NrfA전정료기출.
