植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2001年
4期
330-335,341
,共7页
张晋丹%李艳琴%申泉%赵立平
張晉丹%李豔琴%申泉%趙立平
장진단%리염금%신천%조립평
胡萝卜软腐欧氏杆菌(Erwinia carotovora)%过敏反应%harpin%致病性%诱导抗性
鬍蘿蔔軟腐歐氏桿菌(Erwinia carotovora)%過敏反應%harpin%緻病性%誘導抗性
호라복연부구씨간균(Erwinia carotovora)%과민반응%harpin%치병성%유도항성
本文通过三亲交配将带有梨火疫欧文氏杆菌功能完整的hrp基因簇的重组粘粒pCPP430转移到了胡萝卜软腐欧氏杆菌(Erwinia carotovora)Se9R中.从接合子中提纯的质粒与pCPP430的大小、酶切图谱相同;以该质粒为模板,用针对hrpN序列的引物经PCR扩增得到与hrpN大小相同的片段;用地高辛标记的hrpN作为探针进行Southern blotting分析,在接合子中的质粒上得到预期的杂交带.接合子可以在烟草叶片上稳定地引起过敏反应.另外,接合子可以在寄主马铃薯叶片上引起过敏反应样枯斑,表明异源harpin的表达及功能不受软腐菌的抑制.该接合子在体外产生的果胶酸裂解酶活性与受体菌Se9R无明显差别.低浓度的接合子在马铃薯块茎上的软腐症状明显低于受体菌Se9R.外源harpin表达可能不改变软腐欧氏杆菌的致病力、而是通过诱导马铃薯抗性达到减轻发病的作用.
本文通過三親交配將帶有梨火疫歐文氏桿菌功能完整的hrp基因簇的重組粘粒pCPP430轉移到瞭鬍蘿蔔軟腐歐氏桿菌(Erwinia carotovora)Se9R中.從接閤子中提純的質粒與pCPP430的大小、酶切圖譜相同;以該質粒為模闆,用針對hrpN序列的引物經PCR擴增得到與hrpN大小相同的片段;用地高辛標記的hrpN作為探針進行Southern blotting分析,在接閤子中的質粒上得到預期的雜交帶.接閤子可以在煙草葉片上穩定地引起過敏反應.另外,接閤子可以在寄主馬鈴藷葉片上引起過敏反應樣枯斑,錶明異源harpin的錶達及功能不受軟腐菌的抑製.該接閤子在體外產生的果膠痠裂解酶活性與受體菌Se9R無明顯差彆.低濃度的接閤子在馬鈴藷塊莖上的軟腐癥狀明顯低于受體菌Se9R.外源harpin錶達可能不改變軟腐歐氏桿菌的緻病力、而是通過誘導馬鈴藷抗性達到減輕髮病的作用.
본문통과삼친교배장대유리화역구문씨간균공능완정적hrp기인족적중조점립pCPP430전이도료호라복연부구씨간균(Erwinia carotovora)Se9R중.종접합자중제순적질립여pCPP430적대소、매절도보상동;이해질립위모판,용침대hrpN서렬적인물경PCR확증득도여hrpN대소상동적편단;용지고신표기적hrpN작위탐침진행Southern blotting분석,재접합자중적질립상득도예기적잡교대.접합자가이재연초협편상은정지인기과민반응.령외,접합자가이재기주마령서협편상인기과민반응양고반,표명이원harpin적표체급공능불수연부균적억제.해접합자재체외산생적과효산렬해매활성여수체균Se9R무명현차별.저농도적접합자재마령서괴경상적연부증상명현저우수체균Se9R.외원harpin표체가능불개변연부구씨간균적치병력、이시통과유도마령서항성체도감경발병적작용.
