生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2003年
5期
545-550
,共6页
谢龙旭%徐培林%聂燕芳%田颖川
謝龍旭%徐培林%聶燕芳%田穎川
사룡욱%서배림%섭연방%전영천
转基因烟草%草甘膦%aroAM12%Bts1m%植物表达载体
轉基因煙草%草甘膦%aroAM12%Bts1m%植物錶達載體
전기인연초%초감련%aroAM12%Bts1m%식물표체재체
构建了含草甘膦抗性突变基因(aroAM12)和人工合成重组Bt抗虫基因(Bts1m)的植物表达载体pCM12-s1m. aroAM12基因的表达由CaMV35S启动子控制,Bts1m基因的表达由2E-CaMV35S启动子和Ω因子控制.通过农杆菌介导,将aroAM12和Bts1m基因转化到烟草中,转基因烟草通过在含草甘膦的MS培养基上筛选而获得.Southern blot分析表明所有经过草甘膦筛选出的转化植株都整合有aroAM12基因,约70%的转化植株同时整合有aroAM12和Bts1m基因.Northern blot、Immunodot blot分析进一步证明整合的两个基因在转录、翻译水平上均进行了表达,不同植株之间表达存在着差异.草甘膦抗性和虫试实验证明,获得的转基因烟草对草甘膦和烟青虫具有很强的抗性.
構建瞭含草甘膦抗性突變基因(aroAM12)和人工閤成重組Bt抗蟲基因(Bts1m)的植物錶達載體pCM12-s1m. aroAM12基因的錶達由CaMV35S啟動子控製,Bts1m基因的錶達由2E-CaMV35S啟動子和Ω因子控製.通過農桿菌介導,將aroAM12和Bts1m基因轉化到煙草中,轉基因煙草通過在含草甘膦的MS培養基上篩選而穫得.Southern blot分析錶明所有經過草甘膦篩選齣的轉化植株都整閤有aroAM12基因,約70%的轉化植株同時整閤有aroAM12和Bts1m基因.Northern blot、Immunodot blot分析進一步證明整閤的兩箇基因在轉錄、翻譯水平上均進行瞭錶達,不同植株之間錶達存在著差異.草甘膦抗性和蟲試實驗證明,穫得的轉基因煙草對草甘膦和煙青蟲具有很彊的抗性.
구건료함초감련항성돌변기인(aroAM12)화인공합성중조Bt항충기인(Bts1m)적식물표체재체pCM12-s1m. aroAM12기인적표체유CaMV35S계동자공제,Bts1m기인적표체유2E-CaMV35S계동자화Ω인자공제.통과농간균개도,장aroAM12화Bts1m기인전화도연초중,전기인연초통과재함초감련적MS배양기상사선이획득.Southern blot분석표명소유경과초감련사선출적전화식주도정합유aroAM12기인,약70%적전화식주동시정합유aroAM12화Bts1m기인.Northern blot、Immunodot blot분석진일보증명정합적량개기인재전록、번역수평상균진행료표체,불동식주지간표체존재착차이.초감련항성화충시실험증명,획득적전기인연초대초감련화연청충구유흔강적항성.