水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2004年
4期
344-348
,共5页
宋波%朱菁萍%周明%赵开弘
宋波%硃菁萍%週明%趙開弘
송파%주정평%주명%조개홍
藻蓝蛋白β亚基%藻红蓝蛋白β亚基%定点突变%体外重组
藻藍蛋白β亞基%藻紅藍蛋白β亞基%定點突變%體外重組
조람단백β아기%조홍람단백β아기%정점돌변%체외중조
为研究藻蓝蛋白(PC)和藻红蓝蛋白(PEC)β亚基(分别简称为β-PC、β-PEC)生物合成、结构与功能的关系,用Mega primer PCR定点突变技术设计β-PC、β-PEC中与藻蓝胆素连接的第二个半胱氨酸的定点突变蛋白质β-PC(C155I)和β-PEC(C155I).将相应的基因片段亚克隆于表达载体pET 30a,并转化大肠杆菌BL2l(DE3).经IPTG诱导后,β-PC(C155I)和β-PEC(C155I)在大肠杆菌中均得到了高效表达.β-PC(C155I)和β-PEC(C155I)与藻蓝胆素的重组结果表明两个突变体的结构基本没发生改变,有利于对β-PC和β-PEC的生物合成进行进一步研究.
為研究藻藍蛋白(PC)和藻紅藍蛋白(PEC)β亞基(分彆簡稱為β-PC、β-PEC)生物閤成、結構與功能的關繫,用Mega primer PCR定點突變技術設計β-PC、β-PEC中與藻藍膽素連接的第二箇半胱氨痠的定點突變蛋白質β-PC(C155I)和β-PEC(C155I).將相應的基因片段亞剋隆于錶達載體pET 30a,併轉化大腸桿菌BL2l(DE3).經IPTG誘導後,β-PC(C155I)和β-PEC(C155I)在大腸桿菌中均得到瞭高效錶達.β-PC(C155I)和β-PEC(C155I)與藻藍膽素的重組結果錶明兩箇突變體的結構基本沒髮生改變,有利于對β-PC和β-PEC的生物閤成進行進一步研究.
위연구조람단백(PC)화조홍람단백(PEC)β아기(분별간칭위β-PC、β-PEC)생물합성、결구여공능적관계,용Mega primer PCR정점돌변기술설계β-PC、β-PEC중여조람담소련접적제이개반광안산적정점돌변단백질β-PC(C155I)화β-PEC(C155I).장상응적기인편단아극륭우표체재체pET 30a,병전화대장간균BL2l(DE3).경IPTG유도후,β-PC(C155I)화β-PEC(C155I)재대장간균중균득도료고효표체.β-PC(C155I)화β-PEC(C155I)여조람담소적중조결과표명량개돌변체적결구기본몰발생개변,유리우대β-PC화β-PEC적생물합성진행진일보연구.
