中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2007年
4期
352-354,356
,共4页
郝友华%杨新星%丁红晖%宋娜%朱帆%喻植群%杨东亮
郝友華%楊新星%丁紅暉%宋娜%硃帆%喻植群%楊東亮
학우화%양신성%정홍휘%송나%주범%유식군%양동량
HLA-A*1101抗原肽复合物单体%四聚体
HLA-A*1101抗原肽複閤物單體%四聚體
HLA-A*1101항원태복합물단체%사취체
目的:制备HBc-HLA-A*1101-β2m复合物单体和四聚体,并对其特异性进行了鉴定.方法:原核高效表达的HLA-A*1101-BSP和β2m蛋白,在抗原肽(乙型肝炎病毒的核心蛋白HBc88-96)的存在下,体外复性折叠成可溶性的HLA-A*1101抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体;然后将此复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成四聚体;最后用流式细胞仪检测分析该四聚体结合特异性CTL的能力.结果:Western blot和Dot-ELISA检测显示所制备的HLA-A*1101抗原肽复合物单体具有天然构象,且可被生物素化;流式细胞仪分析显示所制备的四聚体可与HLA-A11+供者的抗原特异性CTL结合.结论:成功制备了具有完整构象的生物素化HLA-A*1101抗原肽复合物单体;此四聚体可以特异检测抗原特异性的细胞毒性T细胞.
目的:製備HBc-HLA-A*1101-β2m複閤物單體和四聚體,併對其特異性進行瞭鑒定.方法:原覈高效錶達的HLA-A*1101-BSP和β2m蛋白,在抗原肽(乙型肝炎病毒的覈心蛋白HBc88-96)的存在下,體外複性摺疊成可溶性的HLA-A*1101抗原肽複閤物單體,經BirA酶作用併通過凝膠過濾層析法純化複閤物單體;然後將此複閤物單體與藻紅蛋白標記的鏈黴親和素按一定比例耦閤構建成四聚體;最後用流式細胞儀檢測分析該四聚體結閤特異性CTL的能力.結果:Western blot和Dot-ELISA檢測顯示所製備的HLA-A*1101抗原肽複閤物單體具有天然構象,且可被生物素化;流式細胞儀分析顯示所製備的四聚體可與HLA-A11+供者的抗原特異性CTL結閤.結論:成功製備瞭具有完整構象的生物素化HLA-A*1101抗原肽複閤物單體;此四聚體可以特異檢測抗原特異性的細胞毒性T細胞.
목적:제비HBc-HLA-A*1101-β2m복합물단체화사취체,병대기특이성진행료감정.방법:원핵고효표체적HLA-A*1101-BSP화β2m단백,재항원태(을형간염병독적핵심단백HBc88-96)적존재하,체외복성절첩성가용성적HLA-A*1101항원태복합물단체,경BirA매작용병통과응효과려층석법순화복합물단체;연후장차복합물단체여조홍단백표기적련매친화소안일정비례우합구건성사취체;최후용류식세포의검측분석해사취체결합특이성CTL적능력.결과:Western blot화Dot-ELISA검측현시소제비적HLA-A*1101항원태복합물단체구유천연구상,차가피생물소화;류식세포의분석현시소제비적사취체가여HLA-A11+공자적항원특이성CTL결합.결론:성공제비료구유완정구상적생물소화HLA-A*1101항원태복합물단체;차사취체가이특이검측항원특이성적세포독성T세포.
