中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2007年
6期
772-776
,共5页
彭瀚%张昕%杜占文%张俊武
彭瀚%張昕%杜佔文%張俊武
팽한%장흔%두점문%장준무
HZF1基因%原核表达%亲和纯化%抗体
HZF1基因%原覈錶達%親和純化%抗體
HZF1기인%원핵표체%친화순화%항체
目的 在大肠杆菌中表达HZF1融合蛋白,制备抗HZF1抗体.方法构建包含编码HZF1非锌指区DNA的重组表达质粒pET30a-HZF1,转化大肠杆菌并用异丙基-a-D-硫代半乳糖苷诱导表达相应的融合蛋白,采用镍柱纯化.以纯化蛋白作为免疫抗原,对新西兰大白兔实施多次免疫(间隔时间分别为3、2和2周).用ELISA和Western blot检测抗体效价和特异性.结果 获得兔抗HZF1抗体,经过ELISA检测,效价在1∶100 000以上.Western blot显示兔抗HZF1抗体能够特异性检测氯高铁血红素诱导的K562细胞中的HZF1蛋白.结论 得到高特异性的兔抗HZF1抗体,为HZF1的功能研究以及组织和细胞中HZF1的检测奠定了一定基础.
目的 在大腸桿菌中錶達HZF1融閤蛋白,製備抗HZF1抗體.方法構建包含編碼HZF1非鋅指區DNA的重組錶達質粒pET30a-HZF1,轉化大腸桿菌併用異丙基-a-D-硫代半乳糖苷誘導錶達相應的融閤蛋白,採用鎳柱純化.以純化蛋白作為免疫抗原,對新西蘭大白兔實施多次免疫(間隔時間分彆為3、2和2週).用ELISA和Western blot檢測抗體效價和特異性.結果 穫得兔抗HZF1抗體,經過ELISA檢測,效價在1∶100 000以上.Western blot顯示兔抗HZF1抗體能夠特異性檢測氯高鐵血紅素誘導的K562細胞中的HZF1蛋白.結論 得到高特異性的兔抗HZF1抗體,為HZF1的功能研究以及組織和細胞中HZF1的檢測奠定瞭一定基礎.
목적 재대장간균중표체HZF1융합단백,제비항HZF1항체.방법구건포함편마HZF1비자지구DNA적중조표체질립pET30a-HZF1,전화대장간균병용이병기-a-D-류대반유당감유도표체상응적융합단백,채용얼주순화.이순화단백작위면역항원,대신서란대백토실시다차면역(간격시간분별위3、2화2주).용ELISA화Western blot검측항체효개화특이성.결과 획득토항HZF1항체,경과ELISA검측,효개재1∶100 000이상.Western blot현시토항HZF1항체능구특이성검측록고철혈홍소유도적K562세포중적HZF1단백.결론 득도고특이성적토항HZF1항체,위HZF1적공능연구이급조직화세포중HZF1적검측전정료일정기출.
