CAJ | 학술논문

背景:目前关于血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)在创伤及整形外科领域主要集中在骨折及组织工程化材料等方面,在软组织损伤方面报道不多.目的:构建的pcDNA3.1-VEGF165质粒,直接注射于大鼠软组织缺损局部,探讨其对软组织缺损修复的影响.设计、时间及地点:于2004-09/2006-01在山东大学动物实验中心和分子生物学实验室完成自身对照观察实验.材料:健康SD大鼠30只.方法:Trizol法提取兔组织中总RNA,反转录合成VEGF165cDNA序列,将此基因片段与pMD18-T构建真核表达载体,双酶切,在T4 DNA连接酶作用下,再与pcDNA3.1载体构建成重组真核表达质粒pcDNA3.1-VEGF165;采用SD大鼠30只,于脊背后部两侧对称部位制备圆形全层皮肤(直径15mm)、肌肉(切除2mm厚肌肉)软组织缺损,两创缘相距4cm;选择一侧为实验组,直接注射0.2mL(含200ng)质粒液,对侧为对照组,以等量生理盐水同法处理.主要观察指标:创面愈合、血管生成及局部胶原表达.结果:30只均进入结果分析.①经赵冬梅等的方法鉴定,pcDNA3.1-VEGF165质粒构建成功.②质粒液局部注射后实验组创面愈合时间早于对照组,差异有显著性意义(P＜0.05);实验组术后7,14d微血管密度高于对照组,差异有显著性意义(P＜0.05).③实验组3d即有Ⅲ型胶原表达,14d达高峰,30d时略有降低.对照组Ⅲ型胶原表达部位和趋势与实验组一致,只是时间延迟.结论:pcDNA3.1-VEGF165质粒局部注射可促进软组织缺损区血管生成和细胞外基质合成,加速创面愈合.
배경:목전관우혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor, VEGF)재창상급정형외과영역주요집중재골절급조직공정화재료등방면,재연조직손상방면보도불다.목적:구건적pcDNA3.1-VEGF165질립,직접주사우대서연조직결손국부,탐토기대연조직결손수복적영향.설계、시간급지점:우2004-09/2006-01재산동대학동물실험중심화분자생물학실험실완성자신대조관찰실험.재료:건강SD대서30지.방법:Trizol법제취토조직중총RNA,반전록합성VEGF165cDNA서렬,장차기인편단여pMD18-T구건진핵표체재체,쌍매절,재T4 DNA련접매작용하,재여pcDNA3.1재체구건성중조진핵표체질립pcDNA3.1-VEGF165;채용SD대서30지,우척배후부량측대칭부위제비원형전층피부(직경15mm)、기육(절제2mm후기육)연조직결손,량창연상거4cm;선택일측위실험조,직접주사0.2mL(함200ng)질립액,대측위대조조,이등량생리염수동법처리.주요관찰지표:창면유합、혈관생성급국부효원표체.결과:30지균진입결과분석.①경조동매등적방법감정,pcDNA3.1-VEGF165질립구건성공.②질립액국부주사후실험조창면유합시간조우대조조,차이유현저성의의(P＜0.05);실험조술후7,14d미혈관밀도고우대조조,차이유현저성의의(P＜0.05).③실험조3d즉유Ⅲ형효원표체,14d체고봉,30d시략유강저.대조조Ⅲ형효원표체부위화추세여실험조일치,지시시간연지.결론:pcDNA3.1-VEGF165질립국부주사가촉진연조직결손구혈관생성화세포외기질합성,가속창면유합.