华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2010年
2期
1-4
,共4页
李君武%刘艳%黄清华%叶秋萍
李君武%劉豔%黃清華%葉鞦萍
리군무%류염%황청화%협추평
结核分枝杆菌%Ag85B基因%globulin-1
結覈分枝桿菌%Ag85B基因%globulin-1
결핵분지간균%Ag85B기인%globulin-1
构建包含结核杆菌Ag85B基因的植物表达载体,并转化农杆菌LBA4404.以pcDNA3-Ag85B为模板,通过常规PCR克隆出Ag85B基因,定向克隆至含有玉米特异性启动子globulin-1的pCR2.1 载体上,然后将globulin-1-Ag85B的融合片段酶切下来,并连接到经过加工修饰的含有抗除草剂基因bar的双元表达载体pCAMBIA1300上,将重组质粒转化至农杆菌LBA4404中.重组质粒双酶切可见0.8 bp和10 kb的两条特异性条带,与预期大小相一致.重组质粒测序表明克隆的Ag85B基因序列与Genbank上相一致,酶切从农杆菌中所抽提的质粒,片段大小与预期相一致.成功构建与转化了携带结核Ag85B基因的植物双元表达载体,为利用植物反应器生产口服结核疫苗奠定基础.
構建包含結覈桿菌Ag85B基因的植物錶達載體,併轉化農桿菌LBA4404.以pcDNA3-Ag85B為模闆,通過常規PCR剋隆齣Ag85B基因,定嚮剋隆至含有玉米特異性啟動子globulin-1的pCR2.1 載體上,然後將globulin-1-Ag85B的融閤片段酶切下來,併連接到經過加工脩飾的含有抗除草劑基因bar的雙元錶達載體pCAMBIA1300上,將重組質粒轉化至農桿菌LBA4404中.重組質粒雙酶切可見0.8 bp和10 kb的兩條特異性條帶,與預期大小相一緻.重組質粒測序錶明剋隆的Ag85B基因序列與Genbank上相一緻,酶切從農桿菌中所抽提的質粒,片段大小與預期相一緻.成功構建與轉化瞭攜帶結覈Ag85B基因的植物雙元錶達載體,為利用植物反應器生產口服結覈疫苗奠定基礎.
구건포함결핵간균Ag85B기인적식물표체재체,병전화농간균LBA4404.이pcDNA3-Ag85B위모판,통과상규PCR극륭출Ag85B기인,정향극륭지함유옥미특이성계동자globulin-1적pCR2.1 재체상,연후장globulin-1-Ag85B적융합편단매절하래,병련접도경과가공수식적함유항제초제기인bar적쌍원표체재체pCAMBIA1300상,장중조질립전화지농간균LBA4404중.중조질립쌍매절가견0.8 bp화10 kb적량조특이성조대,여예기대소상일치.중조질립측서표명극륭적Ag85B기인서렬여Genbank상상일치,매절종농간균중소추제적질립,편단대소여예기상일치.성공구건여전화료휴대결핵Ag85B기인적식물쌍원표체재체,위이용식물반응기생산구복결핵역묘전정기출.
