食品安全质量检测技术
食品安全質量檢測技術
식품안전질량검측기술
FOOD SAFETY AND QUALITY DETECTION TECHNOLOGY
2010年
1期
1-6
,共6页
王晓艳%林纪昀%杨利%郁靓%王文%张浩明%崔迎利%焦红%唐宏
王曉豔%林紀昀%楊利%鬱靚%王文%張浩明%崔迎利%焦紅%唐宏
왕효염%림기윤%양리%욱정%왕문%장호명%최영리%초홍%당굉
恩诺沙星%人工抗原%单克隆抗体
恩諾沙星%人工抗原%單剋隆抗體
은낙사성%인공항원%단극륭항체
为自主研制抗恩诺沙星的高亲和力、高特异性单克隆抗体, 提供动物源食品中恩诺沙星药物残留生物学快速检验方法试剂, 利用碳二亚胺法(carbodiimide, EDC)制备恩诺沙星(enrofloxacin, ENR)的人工抗原, 免疫Balb/c小鼠, 采用PEG融合法, 通过有限稀释法筛选出抗恩诺沙星的单克隆抗体, 获得了两株抗恩诺沙星的单克隆抗体(克隆号:6A4和8D6).经过离子交换法纯化得到的抗体纯度在95%以上, 其中, 纯化后的6A4抗体在1 mg/mL时, 效价达到1.28×10-5, 8E6抗体在1 mg/mL时, 效价达到1.024×10-6.两株单克隆抗体与环丙沙星的交叉反应率为1.5%, 与其他氟喹诺酮类药物不反应.在酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)中, 6A4和8E6抗体的检测限分别为3.125 μg/kg和0.3 μg/kg.采用的半抗原合成以及单克隆抗体筛选的方法可以获得高灵敏度、高特异性的抗恩诺沙星的单克隆抗体, 经后续研究证实单克隆抗体(8E6)可以用于免疫胶体金和酶联免疫法检测食品中残留的恩诺沙星.
為自主研製抗恩諾沙星的高親和力、高特異性單剋隆抗體, 提供動物源食品中恩諾沙星藥物殘留生物學快速檢驗方法試劑, 利用碳二亞胺法(carbodiimide, EDC)製備恩諾沙星(enrofloxacin, ENR)的人工抗原, 免疫Balb/c小鼠, 採用PEG融閤法, 通過有限稀釋法篩選齣抗恩諾沙星的單剋隆抗體, 穫得瞭兩株抗恩諾沙星的單剋隆抗體(剋隆號:6A4和8D6).經過離子交換法純化得到的抗體純度在95%以上, 其中, 純化後的6A4抗體在1 mg/mL時, 效價達到1.28×10-5, 8E6抗體在1 mg/mL時, 效價達到1.024×10-6.兩株單剋隆抗體與環丙沙星的交扠反應率為1.5%, 與其他氟喹諾酮類藥物不反應.在酶聯免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)中, 6A4和8E6抗體的檢測限分彆為3.125 μg/kg和0.3 μg/kg.採用的半抗原閤成以及單剋隆抗體篩選的方法可以穫得高靈敏度、高特異性的抗恩諾沙星的單剋隆抗體, 經後續研究證實單剋隆抗體(8E6)可以用于免疫膠體金和酶聯免疫法檢測食品中殘留的恩諾沙星.
위자주연제항은낙사성적고친화력、고특이성단극륭항체, 제공동물원식품중은낙사성약물잔류생물학쾌속검험방법시제, 이용탄이아알법(carbodiimide, EDC)제비은낙사성(enrofloxacin, ENR)적인공항원, 면역Balb/c소서, 채용PEG융합법, 통과유한희석법사선출항은낙사성적단극륭항체, 획득료량주항은낙사성적단극륭항체(극륭호:6A4화8D6).경과리자교환법순화득도적항체순도재95%이상, 기중, 순화후적6A4항체재1 mg/mL시, 효개체도1.28×10-5, 8E6항체재1 mg/mL시, 효개체도1.024×10-6.량주단극륭항체여배병사성적교차반응솔위1.5%, 여기타불규낙동류약물불반응.재매련면역법(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)중, 6A4화8E6항체적검측한분별위3.125 μg/kg화0.3 μg/kg.채용적반항원합성이급단극륭항체사선적방법가이획득고령민도、고특이성적항은낙사성적단극륭항체, 경후속연구증실단극륭항체(8E6)가이용우면역효체금화매련면역법검측식품중잔류적은낙사성.
