CAJ | 학술논문

油茶是我国主要的木本食用油料树种,拟建立油茶新型SRAP标记(序列相关扩增多态性)的优化PCR体系,以油茶优良品种的总DNA为材料,分析了影响油茶SRAP-PCR的主要参数,包括模板DNA量、引物浓度、dNTPs、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量、退火温度6个因素的影响,建立了适合油茶SRAP-PCR的优化体系为:20 μL的PCR反应体系中,2.0 μL 10×PCR buffer,2.0 mmol/L Mg2+,225 μmol/L dNTPs,0.6 μmol/L引物,30 ng模板DNA和0.75 UTaq DNA聚合酶;最佳PCR循环条件为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5循环;94℃变性1 min,52℃复性1 min,72℃延伸1 min,35循环;最后72℃延伸10 min;4℃保存.本研究结果可为今后利用SRAP这一新型标记技术进行油茶分子遗传学与标记辅助选择育种研究打下基础.
유다시아국주요적목본식용유료수충,의건립유다신형SRAP표기(서렬상관확증다태성)적우화PCR체계,이유다우량품충적총DNA위재료,분석료영향유다SRAP-PCR적주요삼수,포괄모판DNA량、인물농도、dNTPs、Mg2+농도、Taq DNA취합매용량、퇴화온도6개인소적영향,건립료괄합유다SRAP-PCR적우화체계위:20 μL적PCR반응체계중,2.0 μL 10×PCR buffer,2.0 mmol/L Mg2+,225 μmol/L dNTPs,0.6 μmol/L인물,30 ng모판DNA화0.75 UTaq DNA취합매;최가PCR순배조건위:94℃예변성5 min;94℃변성1 min,35℃복성1 min,72℃연신1 min,5순배;94℃변성1 min,52℃복성1 min,72℃연신1 min,35순배;최후72℃연신10 min;4℃보존.본연구결과가위금후이용SRAP저일신형표기기술진행유다분자유전학여표기보조선택육충연구타하기출.