中国医药导报
中國醫藥導報
중국의약도보
CHINA MEDICAL HERALD
2012年
3期
28-30
,共3页
姚志文%刘唯%程由勇%李红玖%李春华%于大海
姚誌文%劉唯%程由勇%李紅玖%李春華%于大海
요지문%류유%정유용%리홍구%리춘화%우대해
血管内皮细胞生长因子%RNA干扰%舌癌
血管內皮細胞生長因子%RNA榦擾%舌癌
혈관내피세포생장인자%RNA간우%설암
目的 构建靶向舌癌Tca8113细胞血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因的siRNA表达载体并在体外检测其对VEGF基因表达的抑制作用.方法 设计合成靶向舌癌Tca8113细胞VEGF基因的siRNA cDNA序列并与Psilencer 2.1-U6-neo连接,构建VEGF-siRNA表达载体(Pu-VEGF-siRNA),酶切鉴定和测序确认后,经脂质体Lipofectamine 2000转染入Tca8113细胞,以空载体组为实验对照组(Pu-HK),未转染组为空白对照组.采用酶联免疫吸附(ELISA)和免疫组化方法检测染后Tca8113细胞VEGF蛋白表达差异.结果 经过双酶切鉴定和测序分析,成功构建了靶向Tca8113细胞VEGF基因的siRNA表达载体.与实验对照组和空白对照相比较,转染Pu-VEGF-siRNA后Tca8113细胞的VEGF蛋白表达明显下降(P < 0.05),但两对照组间差异无统计学意义(P > 0.05).结论 成功构建了靶向舌癌Tca8113细胞VEGF基因的siRNA表达载体,且该载体在体外能有效抑制Tca8113细胞VEGF蛋白的表达.
目的 構建靶嚮舌癌Tca8113細胞血管內皮細胞生長因子(VEGF)基因的siRNA錶達載體併在體外檢測其對VEGF基因錶達的抑製作用.方法 設計閤成靶嚮舌癌Tca8113細胞VEGF基因的siRNA cDNA序列併與Psilencer 2.1-U6-neo連接,構建VEGF-siRNA錶達載體(Pu-VEGF-siRNA),酶切鑒定和測序確認後,經脂質體Lipofectamine 2000轉染入Tca8113細胞,以空載體組為實驗對照組(Pu-HK),未轉染組為空白對照組.採用酶聯免疫吸附(ELISA)和免疫組化方法檢測染後Tca8113細胞VEGF蛋白錶達差異.結果 經過雙酶切鑒定和測序分析,成功構建瞭靶嚮Tca8113細胞VEGF基因的siRNA錶達載體.與實驗對照組和空白對照相比較,轉染Pu-VEGF-siRNA後Tca8113細胞的VEGF蛋白錶達明顯下降(P < 0.05),但兩對照組間差異無統計學意義(P > 0.05).結論 成功構建瞭靶嚮舌癌Tca8113細胞VEGF基因的siRNA錶達載體,且該載體在體外能有效抑製Tca8113細胞VEGF蛋白的錶達.
목적 구건파향설암Tca8113세포혈관내피세포생장인자(VEGF)기인적siRNA표체재체병재체외검측기대VEGF기인표체적억제작용.방법 설계합성파향설암Tca8113세포VEGF기인적siRNA cDNA서렬병여Psilencer 2.1-U6-neo련접,구건VEGF-siRNA표체재체(Pu-VEGF-siRNA),매절감정화측서학인후,경지질체Lipofectamine 2000전염입Tca8113세포,이공재체조위실험대조조(Pu-HK),미전염조위공백대조조.채용매련면역흡부(ELISA)화면역조화방법검측염후Tca8113세포VEGF단백표체차이.결과 경과쌍매절감정화측서분석,성공구건료파향Tca8113세포VEGF기인적siRNA표체재체.여실험대조조화공백대조상비교,전염Pu-VEGF-siRNA후Tca8113세포적VEGF단백표체명현하강(P < 0.05),단량대조조간차이무통계학의의(P > 0.05).결론 성공구건료파향설암Tca8113세포VEGF기인적siRNA표체재체,차해재체재체외능유효억제Tca8113세포VEGF단백적표체.
