CAJ | 학술논문

目的:利用siRNA载体介导的RNA干扰技术靶向沉默EZH2基因,从而观察对卵巢癌裸鼠模型中肿瘤组织EZH2 mRNA的表达水平,探讨siRNA转染之后,EZH2对肿瘤组织黏附、侵袭和转移的作用.方法:采用原位造模方式,即人卵巢癌细胞SKOV3移植方法构建卵巢癌裸鼠模型.将30只卵巢癌裸鼠随机分为3组(n=10):siRNA干扰(EZH2-siRNA组)组、阴性对照组(NC-siRNA组)和空白对照组(Con组),前两组每日分别腹腔注射100μl siRNA 转染复合物和阴性对照转染复合物(1次,共注射5次.末次腹腔注射后48h断颈处死裸鼠,观察腹腔肿瘤组织病灶形成情况,取肿瘤病灶标本.RT-PCR和Western blotting检测肿瘤组织EZH2 mRNA与蛋白表达水平.结果:实验裸鼠共35只,30只造模成功.RT-PCR 检测结果显示,与NC-siRNA组和Con组相比,EZH2-siRNA组EZH2 mRNA表达水平明显下降(P<0.05),而后两者之间差异无统计学意义(P>0.05).Western blotting结果显示,EZH2-siRNA组EZH2蛋白表达明显减弱(P<0.05),而后两者之间差异无统计学意义(P>0.05).结论:EZH2基因siRNA转染之后的肿瘤组织中EZH2 mRNA与蛋白表达明显减弱siRNA转染之后的肿瘤组织的侵袭、转移能力明显下降,EZH2基因表达减弱可以作为基因治疗的新手段.
목적:이용siRNA재체개도적RNA간우기술파향침묵EZH2기인,종이관찰대란소암라서모형중종류조직EZH2 mRNA적표체수평,탐토siRNA전염지후,EZH2대종류조직점부、침습화전이적작용.방법:채용원위조모방식,즉인란소암세포SKOV3이식방법구건란소암라서모형.장30지란소암라서수궤분위3조(n=10):siRNA간우(EZH2-siRNA조)조、음성대조조(NC-siRNA조)화공백대조조(Con조),전량조매일분별복강주사100μl siRNA 전염복합물화음성대조전염복합물(1차,공주사5차.말차복강주사후48h단경처사라서,관찰복강종류조직병조형성정황,취종류병조표본.RT-PCR화Western blotting검측종류조직EZH2 mRNA여단백표체수평.결과:실험라서공35지,30지조모성공.RT-PCR 검측결과현시,여NC-siRNA조화Con조상비,EZH2-siRNA조EZH2 mRNA표체수평명현하강(P<0.05),이후량자지간차이무통계학의의(P>0.05).Western blotting결과현시,EZH2-siRNA조EZH2단백표체명현감약(P<0.05),이후량자지간차이무통계학의의(P>0.05).결론:EZH2기인siRNA전염지후적종류조직중EZH2 mRNA여단백표체명현감약siRNA전염지후적종류조직적침습、전이능력명현하강,EZH2기인표체감약가이작위기인치료적신수단.