中华劳动卫生职业病杂志
中華勞動衛生職業病雜誌
중화노동위생직업병잡지
CHINESE JOURNAL OF INDUSTRIAL HYGIENE AND OCCUPATIONAL DISEASES
2008年
1期
3-6
,共4页
贾效伟%刘秉慈%史香林%高艾%叶萌%张凤梅%刘海峰%焦石
賈效偉%劉秉慈%史香林%高艾%葉萌%張鳳梅%劉海峰%焦石
가효위%류병자%사향림%고애%협맹%장봉매%류해봉%초석
石英%细胞周期%信号传递%转录因子AP-1
石英%細胞週期%信號傳遞%轉錄因子AP-1
석영%세포주기%신호전체%전록인자AP-1
目的 探讨在石英刺激的人胚肺成纤维细胞(human embryo lung fibroblasts,HELF)中转录因子活化蛋白-1(activator protein-1,AP-1)的活性改变,以及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK),AP-1通路在石英诱导的细胞周期改变中的作用.方法 用200 μg/ml石英处理HELF细胞;用免疫荧光法检测细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regdated protein kinase,ERK)和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)蛋白磷酸化水平及细胞分布;运用AP-1荧光素酶报告基因技术检测AP-1荧光素酶活力;用MAPK显性失活突变体(dominant negative mutant,DN)(DN-ERK2、DN-JNKl和DN-p38)证明通路的上下游关系;用流式细胞术检测细胞周期变化.结果 用200μg/ml石英分别处理转染AP-1报告基因的细胞(HELF-AP-1)6、12、24h,结果显示,AP-1活性随着时间变化而发生变化,6 h活性增强,12 h活性达峰值,24 h活性略有降低;用200 μg/ml石英分别处理细胞1和2 h,结果显示,ERK和JNK在石英刺激1 h后,磷酸化水平升高,主要集中于胞浆,2 h后磷酸化水平进一步升高,并主要集中于胞核;200 μg/ml石英处理细胞24 h,G1期细胞所占比例从(63.80±9.57)%下降到(32.23±7.22)%,S期细胞所占比例从(35.17±10.33)%升高到(66.00±8.07)%;AP-1化学抑制剂姜黄素(20μmol/L)可明显减弱石英引起的G1期细胞比例减少和S期细胞比例增加;DN-ERK和DN-JNK的过表达均可明显降低石英诱导的AP-1活性增强,DN-p38的过表达对石英诱导的AP-1活性增强无明显影响.结论 200 μg/ml石英可诱导AP-1活性增强,并通过ERK、JNK/AP-1通路诱导细胞周期改变.
目的 探討在石英刺激的人胚肺成纖維細胞(human embryo lung fibroblasts,HELF)中轉錄因子活化蛋白-1(activator protein-1,AP-1)的活性改變,以及絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK),AP-1通路在石英誘導的細胞週期改變中的作用.方法 用200 μg/ml石英處理HELF細胞;用免疫熒光法檢測細胞外調節蛋白激酶(extracellular signal-regdated protein kinase,ERK)和c-Jun氨基末耑激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)蛋白燐痠化水平及細胞分佈;運用AP-1熒光素酶報告基因技術檢測AP-1熒光素酶活力;用MAPK顯性失活突變體(dominant negative mutant,DN)(DN-ERK2、DN-JNKl和DN-p38)證明通路的上下遊關繫;用流式細胞術檢測細胞週期變化.結果 用200μg/ml石英分彆處理轉染AP-1報告基因的細胞(HELF-AP-1)6、12、24h,結果顯示,AP-1活性隨著時間變化而髮生變化,6 h活性增彊,12 h活性達峰值,24 h活性略有降低;用200 μg/ml石英分彆處理細胞1和2 h,結果顯示,ERK和JNK在石英刺激1 h後,燐痠化水平升高,主要集中于胞漿,2 h後燐痠化水平進一步升高,併主要集中于胞覈;200 μg/ml石英處理細胞24 h,G1期細胞所佔比例從(63.80±9.57)%下降到(32.23±7.22)%,S期細胞所佔比例從(35.17±10.33)%升高到(66.00±8.07)%;AP-1化學抑製劑薑黃素(20μmol/L)可明顯減弱石英引起的G1期細胞比例減少和S期細胞比例增加;DN-ERK和DN-JNK的過錶達均可明顯降低石英誘導的AP-1活性增彊,DN-p38的過錶達對石英誘導的AP-1活性增彊無明顯影響.結論 200 μg/ml石英可誘導AP-1活性增彊,併通過ERK、JNK/AP-1通路誘導細胞週期改變.
목적 탐토재석영자격적인배폐성섬유세포(human embryo lung fibroblasts,HELF)중전록인자활화단백-1(activator protein-1,AP-1)적활성개변,이급사렬원활화단백격매(mitogen activated protein kinase,MAPK),AP-1통로재석영유도적세포주기개변중적작용.방법 용200 μg/ml석영처리HELF세포;용면역형광법검측세포외조절단백격매(extracellular signal-regdated protein kinase,ERK)화c-Jun안기말단격매(c-Jun N-terminal kinase,JNK)단백린산화수평급세포분포;운용AP-1형광소매보고기인기술검측AP-1형광소매활력;용MAPK현성실활돌변체(dominant negative mutant,DN)(DN-ERK2、DN-JNKl화DN-p38)증명통로적상하유관계;용류식세포술검측세포주기변화.결과 용200μg/ml석영분별처리전염AP-1보고기인적세포(HELF-AP-1)6、12、24h,결과현시,AP-1활성수착시간변화이발생변화,6 h활성증강,12 h활성체봉치,24 h활성략유강저;용200 μg/ml석영분별처리세포1화2 h,결과현시,ERK화JNK재석영자격1 h후,린산화수평승고,주요집중우포장,2 h후린산화수평진일보승고,병주요집중우포핵;200 μg/ml석영처리세포24 h,G1기세포소점비례종(63.80±9.57)%하강도(32.23±7.22)%,S기세포소점비례종(35.17±10.33)%승고도(66.00±8.07)%;AP-1화학억제제강황소(20μmol/L)가명현감약석영인기적G1기세포비례감소화S기세포비례증가;DN-ERK화DN-JNK적과표체균가명현강저석영유도적AP-1활성증강,DN-p38적과표체대석영유도적AP-1활성증강무명현영향.결론 200 μg/ml석영가유도AP-1활성증강,병통과ERK、JNK/AP-1통로유도세포주기개변.
