中华妇产科杂志
中華婦產科雜誌
중화부산과잡지
CHINESE JOUNAL OF OBSTETRICS AND GYNECOLOGY
2012年
10期
756-763
,共8页
杜雪莲%盛修贵%颜春晓%刘婷%王聪%宋趣清%李庆水
杜雪蓮%盛脩貴%顏春曉%劉婷%王聰%宋趣清%李慶水
두설련%성수귀%안춘효%류정%왕총%송취청%리경수
子宫内膜肿瘤%子宫内膜%内皮细胞%新生血管化,病理性%寡核苷酸序列分析
子宮內膜腫瘤%子宮內膜%內皮細胞%新生血管化,病理性%寡覈苷痠序列分析
자궁내막종류%자궁내막%내피세포%신생혈관화,병이성%과핵감산서렬분석
Endometrial neoplasms%Endometrium%Endothelial cells%Neovascularization,pathologic%Oligonucleotide array sequence analysis
目的 筛选并验证子宫内膜癌和正常子宫内膜组织人子宫内膜血管内皮细胞(HEEC)中肿瘤血管生成相关的差异表达基因.方法 (1)选取山东省肿瘤医院2007年6-11月间收治的5例子宫内膜癌患者的癌组织(内膜癌组1)以及5例因妇科良性病变行子宫切除术患者的正常子宫内膜组织(对照组1)标本,分离两组HEEC,应用基因芯片技术检测子宫内膜癌组织HEEC中差异表达基因(指差异表达倍数＞2或＜0.5者,其中差异表达倍数＞2者为上调基因、差异表达倍数＜0.5者为下调基因),筛选出其中与肿瘤血管生成密切相关的基因.(2)另选取2007年1月-2008年4月间收治的36例子宫内膜癌患者的癌组织(内膜癌组2)以及10例因妇科良性病变行子宫切除术患者的正常子宫内膜组织(对照组2)标本,实时定量PCR技术和免疫组化法验证两组HEEC中差异表达上调基因——内皮细胞特异分子1(ESM1)、基质金属蛋白酶(MMP) 10、骨桥蛋白(SPP1)、高移动族框1(HMGB1) mRNA和蛋白的表达.比较实时定量PCR技术和免疫组化法检测结果与基因芯片技术检测结果的一致性.结果 (1)基因芯片技术检测显示,从内膜癌组1和对照组1中共筛选出317个差异表达基因,其中191个为上调基因、126个为下调基因.上调基因主要包括与细胞外基质功能、细胞周期调节相关的基因,其中与肿瘤血管生成相关的差异表达基因97个；下调基因主要包括具有潜在抗血管生成和增殖作用的基因,其中与肿瘤血管生成相关的差异表达基因44个.(2)实时定量PCR技术检测显示,内膜癌组2 HEEC中ESM1、MMP-10、SPP1、HMGB1 mRNA的表达水平分别为0.898、3.890、1.443、1.881,分别与对照组2(分别为0.112、0.323、0.045、0.414)比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).免疫组化法检测显示,内膜癌组2 HEEC中SPP1、MMP-10、ESM1、HMGB1蛋白均呈阳性表达,而对照组2中SPP1、ESM1、HMGB1蛋白均呈阴性表达.实时定量PCR技术和免疫组化法检测结果与基因芯片技术检测结果具有良好的一致性.结论 子宫内膜癌和正常子宫内膜组织HEEC中肿瘤血管生成相关基因的表达存在明显差异,这些差异表达基因为子宫内膜癌抗血管生成治疗研究提供了新的靶点.
目的 篩選併驗證子宮內膜癌和正常子宮內膜組織人子宮內膜血管內皮細胞(HEEC)中腫瘤血管生成相關的差異錶達基因.方法 (1)選取山東省腫瘤醫院2007年6-11月間收治的5例子宮內膜癌患者的癌組織(內膜癌組1)以及5例因婦科良性病變行子宮切除術患者的正常子宮內膜組織(對照組1)標本,分離兩組HEEC,應用基因芯片技術檢測子宮內膜癌組織HEEC中差異錶達基因(指差異錶達倍數＞2或＜0.5者,其中差異錶達倍數＞2者為上調基因、差異錶達倍數＜0.5者為下調基因),篩選齣其中與腫瘤血管生成密切相關的基因.(2)另選取2007年1月-2008年4月間收治的36例子宮內膜癌患者的癌組織(內膜癌組2)以及10例因婦科良性病變行子宮切除術患者的正常子宮內膜組織(對照組2)標本,實時定量PCR技術和免疫組化法驗證兩組HEEC中差異錶達上調基因——內皮細胞特異分子1(ESM1)、基質金屬蛋白酶(MMP) 10、骨橋蛋白(SPP1)、高移動族框1(HMGB1) mRNA和蛋白的錶達.比較實時定量PCR技術和免疫組化法檢測結果與基因芯片技術檢測結果的一緻性.結果 (1)基因芯片技術檢測顯示,從內膜癌組1和對照組1中共篩選齣317箇差異錶達基因,其中191箇為上調基因、126箇為下調基因.上調基因主要包括與細胞外基質功能、細胞週期調節相關的基因,其中與腫瘤血管生成相關的差異錶達基因97箇；下調基因主要包括具有潛在抗血管生成和增殖作用的基因,其中與腫瘤血管生成相關的差異錶達基因44箇.(2)實時定量PCR技術檢測顯示,內膜癌組2 HEEC中ESM1、MMP-10、SPP1、HMGB1 mRNA的錶達水平分彆為0.898、3.890、1.443、1.881,分彆與對照組2(分彆為0.112、0.323、0.045、0.414)比較,差異均有統計學意義(P＜0.05).免疫組化法檢測顯示,內膜癌組2 HEEC中SPP1、MMP-10、ESM1、HMGB1蛋白均呈暘性錶達,而對照組2中SPP1、ESM1、HMGB1蛋白均呈陰性錶達.實時定量PCR技術和免疫組化法檢測結果與基因芯片技術檢測結果具有良好的一緻性.結論 子宮內膜癌和正常子宮內膜組織HEEC中腫瘤血管生成相關基因的錶達存在明顯差異,這些差異錶達基因為子宮內膜癌抗血管生成治療研究提供瞭新的靶點.
목적 사선병험증자궁내막암화정상자궁내막조직인자궁내막혈관내피세포(HEEC)중종류혈관생성상관적차이표체기인.방법 (1)선취산동성종류의원2007년6-11월간수치적5례자궁내막암환자적암조직(내막암조1)이급5례인부과량성병변행자궁절제술환자적정상자궁내막조직(대조조1)표본,분리량조HEEC,응용기인심편기술검측자궁내막암조직HEEC중차이표체기인(지차이표체배수＞2혹＜0.5자,기중차이표체배수＞2자위상조기인、차이표체배수＜0.5자위하조기인),사선출기중여종류혈관생성밀절상관적기인.(2)령선취2007년1월-2008년4월간수치적36례자궁내막암환자적암조직(내막암조2)이급10례인부과량성병변행자궁절제술환자적정상자궁내막조직(대조조2)표본,실시정량PCR기술화면역조화법험증량조HEEC중차이표체상조기인——내피세포특이분자1(ESM1)、기질금속단백매(MMP) 10、골교단백(SPP1)、고이동족광1(HMGB1) mRNA화단백적표체.비교실시정량PCR기술화면역조화법검측결과여기인심편기술검측결과적일치성.결과 (1)기인심편기술검측현시,종내막암조1화대조조1중공사선출317개차이표체기인,기중191개위상조기인、126개위하조기인.상조기인주요포괄여세포외기질공능、세포주기조절상관적기인,기중여종류혈관생성상관적차이표체기인97개；하조기인주요포괄구유잠재항혈관생성화증식작용적기인,기중여종류혈관생성상관적차이표체기인44개.(2)실시정량PCR기술검측현시,내막암조2 HEEC중ESM1、MMP-10、SPP1、HMGB1 mRNA적표체수평분별위0.898、3.890、1.443、1.881,분별여대조조2(분별위0.112、0.323、0.045、0.414)비교,차이균유통계학의의(P＜0.05).면역조화법검측현시,내막암조2 HEEC중SPP1、MMP-10、ESM1、HMGB1단백균정양성표체,이대조조2중SPP1、ESM1、HMGB1단백균정음성표체.실시정량PCR기술화면역조화법검측결과여기인심편기술검측결과구유량호적일치성.결론 자궁내막암화정상자궁내막조직HEEC중종류혈관생성상관기인적표체존재명현차이,저사차이표체기인위자궁내막암항혈관생성치료연구제공료신적파점.
Objective To identify and verify the different genes expression pattern between human endometrial endothelial cells (HEEC) isolated from endometrial cancer and normal endometrium.Methods Endothelial cells were isolated from 5 patients with endometrial cancer (endometrial cancer group 1) and 5 patients with normal endometria tissue (control group 1) admitted from June to November 2007 in Shandong Cancer Hospital.Global expression patterns of endothelial cells were examined using oligonucleotide microarrays.Tissues from 36 patients with endometrial cancer(endometrial cancer group 2) and 10 normal endometrial tissues (control group 2) admitted from January 2007 to April 2008 were selected to verify the expression of different genes,in which up-regulated genes including ESM1,MMP-10,SPP1 and HMGB1 were tested by quantitative real-time PCR and immunohistochemistry.Results Microarray analyses revealed 317 genes that exhibited ＞ 2-fold or ＜ 0.5 differences were identified (including 191 genes up-regulated and 126 down-regulated).Pathway analysis showed that these genes involved cell cycle,cell adhesion molecules,and extracellular matrix-receptor interaction were obviously predominant.Of them,97 up-regulated genes and 44 down-regulated genes were related to angiogenesis.The mRNA expression of ESM1,MMP-10,SPP1 and HMGB1 in endometrial cancer group 2 were 0.898、3.890、1.433 and 1.881,respectively.Positive expression of SPP1,MMP-10,ESM1 and HMGB1 was observed in endometrial cancer group 2.However,the SPP1,ESM1 and HMGB1 was negative expressed in control group 2.Conclusion It shows that there are the different angiogenesis related genes between endometrial cancer and normal endothelium,which will provide insights into the anti-angiogenesis therapy for endometrial cancers.
