细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
6期
590-593
,共4页
罗先富%章斌%马泓冰%汤琳%周璇%徐颖%吴翼伟%张学光
囉先富%章斌%馬泓冰%湯琳%週璇%徐穎%吳翼偉%張學光
라선부%장빈%마홍빙%탕림%주선%서영%오익위%장학광
125I标记%氯氨-T法%CD40%卵巢肿瘤%单克隆抗体
125I標記%氯氨-T法%CD40%卵巢腫瘤%單剋隆抗體
125I표기%록안-T법%CD40%란소종류%단극륭항체
目的:研究抗人CD40单克隆抗体(mAb)5H6的125I标记及与卵巢癌细胞株HO8910体外结合的生物学特性.方法:氯氨-T法125I标记mAb 5H6(125I-5H6),纸层析法测定125I-5H6的标记率和放射化学纯度,三氯醋酸沉淀法分析125I-5H6体外稳定性,细胞结合饱和实验进行Scatchard分析,lindmo法及其改良方法计算125I-5H6的免疫活性分数,细胞结合实验分析125I-5H6同HO8910细胞的内化和滞留.结果:(1)mAb5H6的125I标记率为(85.4±5.2)%,放射化学纯度为(99.2±0.5)%.(2)125I-5H6存放于4℃磷酸缓冲液中7 d后其放射化学纯度为(80.3±4.7)%,在37℃血浆中存放24h后其放射化学纯度为(95.3±0.8)%.(3)125I-5H6与HO8910细胞亲和力Kd=(0.711±0.06)nmol/L,最大结合位点数(Bmasx)=(2.17±0.08)×105个/细胞.(4)125I-5H6免疫活性分数达(38.6±5.4)%.(5)4℃2 h125I-5H6同HO8910细胞滞留率为(89.8±6.0)%,37℃2 h125I-5H6同HO8910细胞内化率达(54.9±2.6)%.结论:氯氨-T法进行125I-5H6标记具有良好的标记率和放射化学纯度,以及良好的体外稳定性和较高的免疫活性分数,且125I-5H6与HO8910细胞具有很高的亲和力,可用于动物体内实验.
目的:研究抗人CD40單剋隆抗體(mAb)5H6的125I標記及與卵巢癌細胞株HO8910體外結閤的生物學特性.方法:氯氨-T法125I標記mAb 5H6(125I-5H6),紙層析法測定125I-5H6的標記率和放射化學純度,三氯醋痠沉澱法分析125I-5H6體外穩定性,細胞結閤飽和實驗進行Scatchard分析,lindmo法及其改良方法計算125I-5H6的免疫活性分數,細胞結閤實驗分析125I-5H6同HO8910細胞的內化和滯留.結果:(1)mAb5H6的125I標記率為(85.4±5.2)%,放射化學純度為(99.2±0.5)%.(2)125I-5H6存放于4℃燐痠緩遲液中7 d後其放射化學純度為(80.3±4.7)%,在37℃血漿中存放24h後其放射化學純度為(95.3±0.8)%.(3)125I-5H6與HO8910細胞親和力Kd=(0.711±0.06)nmol/L,最大結閤位點數(Bmasx)=(2.17±0.08)×105箇/細胞.(4)125I-5H6免疫活性分數達(38.6±5.4)%.(5)4℃2 h125I-5H6同HO8910細胞滯留率為(89.8±6.0)%,37℃2 h125I-5H6同HO8910細胞內化率達(54.9±2.6)%.結論:氯氨-T法進行125I-5H6標記具有良好的標記率和放射化學純度,以及良好的體外穩定性和較高的免疫活性分數,且125I-5H6與HO8910細胞具有很高的親和力,可用于動物體內實驗.
목적:연구항인CD40단극륭항체(mAb)5H6적125I표기급여란소암세포주HO8910체외결합적생물학특성.방법:록안-T법125I표기mAb 5H6(125I-5H6),지층석법측정125I-5H6적표기솔화방사화학순도,삼록작산침정법분석125I-5H6체외은정성,세포결합포화실험진행Scatchard분석,lindmo법급기개량방법계산125I-5H6적면역활성분수,세포결합실험분석125I-5H6동HO8910세포적내화화체류.결과:(1)mAb5H6적125I표기솔위(85.4±5.2)%,방사화학순도위(99.2±0.5)%.(2)125I-5H6존방우4℃린산완충액중7 d후기방사화학순도위(80.3±4.7)%,재37℃혈장중존방24h후기방사화학순도위(95.3±0.8)%.(3)125I-5H6여HO8910세포친화력Kd=(0.711±0.06)nmol/L,최대결합위점수(Bmasx)=(2.17±0.08)×105개/세포.(4)125I-5H6면역활성분수체(38.6±5.4)%.(5)4℃2 h125I-5H6동HO8910세포체류솔위(89.8±6.0)%,37℃2 h125I-5H6동HO8910세포내화솔체(54.9±2.6)%.결론:록안-T법진행125I-5H6표기구유량호적표기솔화방사화학순도,이급량호적체외은정성화교고적면역활성분수,차125I-5H6여HO8910세포구유흔고적친화력,가용우동물체내실험.
