微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2008年
12期
1623-1628
,共6页
靳永新%李铁梅%夏惠明%谷彩凤%张秀明%白艳玲%徐海津%乔明强
靳永新%李鐵梅%夏惠明%穀綵鳳%張秀明%白豔玲%徐海津%喬明彊
근영신%리철매%하혜명%곡채봉%장수명%백염령%서해진%교명강
铜绿假单胞菌%弹性蛋白酶%转录水平
銅綠假單胞菌%彈性蛋白酶%轉錄水平
동록가단포균%탄성단백매%전록수평
[目的]研究铜绿假单胞菌弹性蛋白水解能力相关基因.[方法]应用人工Mu转座技术构建铜绿假单胞菌野生型菌株队68的转座突变文库,从2000多个突变子中筛选得到4株弹性蛋白水解能力改变的突变子,并通过克隆及测序获得转座子插入位点侧翼的序列.将铜绿假单胞菌弹性蛋白酶结构基因lasB的转录启始区序列整合人载体pDN19lacΩ.并将该重组质粒电转化人野生型菌株以68及4个突变株中,对报告基因在不同菌株中的表达水平进行测定.[结果]发现4个突变株中Mu转座子分别插人lasA、galu、xcpz和ptsP4个基因.ptsP基因失活的突变株中,lasB基因的转录水平是野生型菌株的7%,xcpZ和lasA基因的失活使lasB基因的转录水平分别降低为野生株的54%和75%,galU基因的插入失活使lasB基因的转录上升了1倍.[结论]推测ptsP和galU基因很可能直接或间接地调控着弹性蛋白酶的生物合成.
[目的]研究銅綠假單胞菌彈性蛋白水解能力相關基因.[方法]應用人工Mu轉座技術構建銅綠假單胞菌野生型菌株隊68的轉座突變文庫,從2000多箇突變子中篩選得到4株彈性蛋白水解能力改變的突變子,併通過剋隆及測序穫得轉座子插入位點側翼的序列.將銅綠假單胞菌彈性蛋白酶結構基因lasB的轉錄啟始區序列整閤人載體pDN19lacΩ.併將該重組質粒電轉化人野生型菌株以68及4箇突變株中,對報告基因在不同菌株中的錶達水平進行測定.[結果]髮現4箇突變株中Mu轉座子分彆插人lasA、galu、xcpz和ptsP4箇基因.ptsP基因失活的突變株中,lasB基因的轉錄水平是野生型菌株的7%,xcpZ和lasA基因的失活使lasB基因的轉錄水平分彆降低為野生株的54%和75%,galU基因的插入失活使lasB基因的轉錄上升瞭1倍.[結論]推測ptsP和galU基因很可能直接或間接地調控著彈性蛋白酶的生物閤成.
[목적]연구동록가단포균탄성단백수해능력상관기인.[방법]응용인공Mu전좌기술구건동록가단포균야생형균주대68적전좌돌변문고,종2000다개돌변자중사선득도4주탄성단백수해능력개변적돌변자,병통과극륭급측서획득전좌자삽입위점측익적서렬.장동록가단포균탄성단백매결구기인lasB적전록계시구서렬정합인재체pDN19lacΩ.병장해중조질립전전화인야생형균주이68급4개돌변주중,대보고기인재불동균주중적표체수평진행측정.[결과]발현4개돌변주중Mu전좌자분별삽인lasA、galu、xcpz화ptsP4개기인.ptsP기인실활적돌변주중,lasB기인적전록수평시야생형균주적7%,xcpZ화lasA기인적실활사lasB기인적전록수평분별강저위야생주적54%화75%,galU기인적삽입실활사lasB기인적전록상승료1배.[결론]추측ptsP화galU기인흔가능직접혹간접지조공착탄성단백매적생물합성.
