O型FMDV P1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒的构建及其在BHK-21细胞中的表达
O형FMDV P1-2A기인여저IFN-γ기인공표체질립적구건급기재BHK-21세포중적표체
Construction of Co-expressing Plasmid of FMDV P1-2A Gene with Porcine IFN-γ Gene and Expression in BHK-21 Cells
  • 万方数据
    华北农学报 화북농학보
    ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
    2010年 5期 11-15 ,共5页

    吴国华%张强%颜新敏%侯俊玲%赵志荀%崔力凡%李健%朱海霞%朱彩珠

    오국화%장강%안신민%후준령%조지순%최력범%리건%주해하%주채주

    FMDV%P1-2A基因%IFN-γ基因%共表达 FMDV%P1-2A基因%IFN-γ基因%共錶達
    FMDV%P1-2A기인%IFN-γ기인%공표체
    为了构建O型FMDV P1-2A基因与猪IFN-γ基因共表达质粒并在BHK-21细胞中进行表达,本研究利用聚合酶链式反应(PCR)从阳性质粒pGEM-P12A克隆到P1-2A基因,将扩增产物纯化、双酶切后连接到pBudCE-IFN载体,构建重组质粒pBudCE-IFN-P1-2A.重组表达质粒鉴定后,在脂质体介导下转染BHK-21细胞,用RT-PCR和直接免疫荧光试验分别检测P1-2A 和IFN-γ在BHK-21细胞中的表达.RT-PCR检测显示,重组表达质粒转染细胞后P1-2A 和IFN-γ基因成功转录出mRNA;免疫荧光试验表明目的基因在BHK-21细胞中获得了表达.结果证明,本研究成功构建了重组质粒pBudCE-IFN-P1-2A并在体外进行了表达,这为研制抗FMDV DNA疫苗和IFN-γ的佐剂作用奠定了坚实基础.
    위료구건O형FMDV P1-2A기인여저IFN-γ기인공표체질립병재BHK-21세포중진행표체,본연구이용취합매련식반응(PCR)종양성질립pGEM-P12A극륭도P1-2A기인,장확증산물순화、쌍매절후련접도pBudCE-IFN재체,구건중조질립pBudCE-IFN-P1-2A.중조표체질립감정후,재지질체개도하전염BHK-21세포,용RT-PCR화직접면역형광시험분별검측P1-2A 화IFN-γ재BHK-21세포중적표체.RT-PCR검측현시,중조표체질립전염세포후P1-2A 화IFN-γ기인성공전록출mRNA;면역형광시험표명목적기인재BHK-21세포중획득료표체.결과증명,본연구성공구건료중조질립pBudCE-IFN-P1-2A병재체외진행료표체,저위연제항FMDV DNA역묘화IFN-γ적좌제작용전정료견실기출.
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