中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2011年
6期
491-493
,共3页
刘芙蓉%李彦妹%张红艳%苏楠%李家滨%李丰
劉芙蓉%李彥妹%張紅豔%囌楠%李傢濱%李豐
류부용%리언매%장홍염%소남%리가빈%리봉
SCG10%蛋白纯化%融合蛋白%Western blot
SCG10%蛋白純化%融閤蛋白%Western blot
SCG10%단백순화%융합단백%Western blot
目的 构建SCG10的原核表达载体并诱导、纯化和鉴定其表达.方法 pcDNA3.1-SCG10质粒用BamHI和XhoI双酶切后,克隆至pGEX-5X-1栽体,IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)在BL21大肠杆茵中诱导glutathione S-transferase(GST)-SCG10 融合蛋白表达,利用GST-beads纯化诱导的融合蛋白,经Western blot印迹鉴定.结果 SCG10全长编码序列克隆至pGEX-5x-1载体中,双酶切鉴定片段大小为500 bp,在BL21大肠杆茵中IPTG诱导融合蛋白的表达分子量为47 kDa,成功纯化出GST及GST-SCGl0蛋白,Wstem blot检测到蛋白表达.结论 构建了SCG10基因原核表达载体,鉴定了GST-SCG10融合蛋白表达.
目的 構建SCG10的原覈錶達載體併誘導、純化和鑒定其錶達.方法 pcDNA3.1-SCG10質粒用BamHI和XhoI雙酶切後,剋隆至pGEX-5X-1栽體,IPTG(異丙基硫代半乳糖苷)在BL21大腸桿茵中誘導glutathione S-transferase(GST)-SCG10 融閤蛋白錶達,利用GST-beads純化誘導的融閤蛋白,經Western blot印跡鑒定.結果 SCG10全長編碼序列剋隆至pGEX-5x-1載體中,雙酶切鑒定片段大小為500 bp,在BL21大腸桿茵中IPTG誘導融閤蛋白的錶達分子量為47 kDa,成功純化齣GST及GST-SCGl0蛋白,Wstem blot檢測到蛋白錶達.結論 構建瞭SCG10基因原覈錶達載體,鑒定瞭GST-SCG10融閤蛋白錶達.
목적 구건SCG10적원핵표체재체병유도、순화화감정기표체.방법 pcDNA3.1-SCG10질립용BamHI화XhoI쌍매절후,극륭지pGEX-5X-1재체,IPTG(이병기류대반유당감)재BL21대장간인중유도glutathione S-transferase(GST)-SCG10 융합단백표체,이용GST-beads순화유도적융합단백,경Western blot인적감정.결과 SCG10전장편마서렬극륭지pGEX-5x-1재체중,쌍매절감정편단대소위500 bp,재BL21대장간인중IPTG유도융합단백적표체분자량위47 kDa,성공순화출GST급GST-SCGl0단백,Wstem blot검측도단백표체.결론 구건료SCG10기인원핵표체재체,감정료GST-SCG10융합단백표체.
