山东大学学报（医学版）
山東大學學報（醫學版）
산동대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2006年
10期
973-977
,共5页
刘闻闻%于春晓%崔福爱%张鹏举%胡晓燕%陈蔚文%张建业%姜安丽
劉聞聞%于春曉%崔福愛%張鵬舉%鬍曉燕%陳蔚文%張建業%薑安麗
류문문%우춘효%최복애%장붕거%호효연%진위문%장건업%강안려
基因,同源盒%真核表达载体%基因表达%转染
基因,同源盒%真覈錶達載體%基因錶達%轉染
기인,동원합%진핵표체재체%기인표체%전염
目的:构建人同源盒基因NKX3.1 cDNA真核表达载体,研究其在前列腺癌细胞PC-3、LNCaP中的表达情况.方法:以人前列腺癌细胞LNCaP细胞中的总RNA为模板,RT-PCR扩增NKX3.1基因全长编码片段,T/A克隆至pCR2.1载体中.经酶切、测序鉴定后,将NKX3.1cDNA重组到真核表达载体pcDNA3.1(+)中.将pcDNA3.1-NKX3.1表达载体瞬时转染前列腺癌细胞PC-3和LNCaP 细胞,RT-PCR和Western blot法检测NKX3.1cDNA在转录水平和蛋白水平的表达.结果:人同源盒基因NKX3.1 cDNA真核表达载体pcDNA3.1-NKX3.1经酶切及测序鉴定正确. pcDNA3.1-NKX3.1转染PC-3和LNCaP细胞后,经RT-PCR和Western blot证明在mRNA和蛋白水平均能有效表达NKX3.1.结论:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-NKX3.1, 转染前列腺癌细胞PC-3和LNCaP后能有效表达.
目的:構建人同源盒基因NKX3.1 cDNA真覈錶達載體,研究其在前列腺癌細胞PC-3、LNCaP中的錶達情況.方法:以人前列腺癌細胞LNCaP細胞中的總RNA為模闆,RT-PCR擴增NKX3.1基因全長編碼片段,T/A剋隆至pCR2.1載體中.經酶切、測序鑒定後,將NKX3.1cDNA重組到真覈錶達載體pcDNA3.1(+)中.將pcDNA3.1-NKX3.1錶達載體瞬時轉染前列腺癌細胞PC-3和LNCaP 細胞,RT-PCR和Western blot法檢測NKX3.1cDNA在轉錄水平和蛋白水平的錶達.結果:人同源盒基因NKX3.1 cDNA真覈錶達載體pcDNA3.1-NKX3.1經酶切及測序鑒定正確. pcDNA3.1-NKX3.1轉染PC-3和LNCaP細胞後,經RT-PCR和Western blot證明在mRNA和蛋白水平均能有效錶達NKX3.1.結論:成功構建瞭真覈錶達載體pcDNA3.1-NKX3.1, 轉染前列腺癌細胞PC-3和LNCaP後能有效錶達.
목적:구건인동원합기인NKX3.1 cDNA진핵표체재체,연구기재전렬선암세포PC-3、LNCaP중적표체정황.방법:이인전렬선암세포LNCaP세포중적총RNA위모판,RT-PCR확증NKX3.1기인전장편마편단,T/A극륭지pCR2.1재체중.경매절、측서감정후,장NKX3.1cDNA중조도진핵표체재체pcDNA3.1(+)중.장pcDNA3.1-NKX3.1표체재체순시전염전렬선암세포PC-3화LNCaP 세포,RT-PCR화Western blot법검측NKX3.1cDNA재전록수평화단백수평적표체.결과:인동원합기인NKX3.1 cDNA진핵표체재체pcDNA3.1-NKX3.1경매절급측서감정정학. pcDNA3.1-NKX3.1전염PC-3화LNCaP세포후,경RT-PCR화Western blot증명재mRNA화단백수평균능유효표체NKX3.1.결론:성공구건료진핵표체재체pcDNA3.1-NKX3.1, 전염전렬선암세포PC-3화LNCaP후능유효표체.
