核农学报
覈農學報
핵농학보
ACTA AGRICULTURAE NUCLEATAE SINICA
2007年
1期
79-82
,共4页
王文珺%许艇%高宏斌%赵继勋%张国中%李季
王文珺%許艇%高宏斌%趙繼勛%張國中%李季
왕문군%허정%고굉빈%조계훈%장국중%리계
己烯雌酚%单克隆抗体%酶联免疫吸附分析
己烯雌酚%單剋隆抗體%酶聯免疫吸附分析
기희자분%단극륭항체%매련면역흡부분석
合成了己烯雌酚的半抗原CP-DES,并将半抗原与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)共价偶联制备免疫原和包被原.将免疫好的Balb/c小鼠脾脏细胞和SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选出了1株能稳定分泌己烯雌酚单克隆抗体的杂交瘤细胞株2Ds7C412C7.分析该杂交瘤细胞的染色体,并以间接酶联免疫吸附分析法(iELISA)检测了单克隆抗体免疫球蛋白的类型.获得的杂交瘤细胞的平均染色体数目为45～50对左右,它分泌IgG1亚类的单克隆抗体.该细胞株体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定,细胞上清效价大于640,诱导腹水效价大于1Os,该单克隆抗体的检测限IC20=2.3ng/ml,与己烯雌酚结构类似物存在一定的交叉反应,与两种载体蛋白(BSA,OVA)无交叉反应.本研究为己烯雌酚ELISA检测方法的建立提供了条件.
閤成瞭己烯雌酚的半抗原CP-DES,併將半抗原與牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)共價偶聯製備免疫原和包被原.將免疫好的Balb/c小鼠脾髒細胞和SP2/0骨髓瘤細胞融閤,篩選齣瞭1株能穩定分泌己烯雌酚單剋隆抗體的雜交瘤細胞株2Ds7C412C7.分析該雜交瘤細胞的染色體,併以間接酶聯免疫吸附分析法(iELISA)檢測瞭單剋隆抗體免疫毬蛋白的類型.穫得的雜交瘤細胞的平均染色體數目為45～50對左右,它分泌IgG1亞類的單剋隆抗體.該細胞株體外傳代和凍存複囌後抗體分泌穩定,細胞上清效價大于640,誘導腹水效價大于1Os,該單剋隆抗體的檢測限IC20=2.3ng/ml,與己烯雌酚結構類似物存在一定的交扠反應,與兩種載體蛋白(BSA,OVA)無交扠反應.本研究為己烯雌酚ELISA檢測方法的建立提供瞭條件.
합성료기희자분적반항원CP-DES,병장반항원여우혈청단백(BSA)화란청단백(OVA)공개우련제비면역원화포피원.장면역호적Balb/c소서비장세포화SP2/0골수류세포융합,사선출료1주능은정분비기희자분단극륭항체적잡교류세포주2Ds7C412C7.분석해잡교류세포적염색체,병이간접매련면역흡부분석법(iELISA)검측료단극륭항체면역구단백적류형.획득적잡교류세포적평균염색체수목위45～50대좌우,타분비IgG1아류적단극륭항체.해세포주체외전대화동존복소후항체분비은정,세포상청효개대우640,유도복수효개대우1Os,해단극륭항체적검측한IC20=2.3ng/ml,여기희자분결구유사물존재일정적교차반응,여량충재체단백(BSA,OVA)무교차반응.본연구위기희자분ELISA검측방법적건립제공료조건.
