CAJ | 학술논문

[目的]克隆C57BL/6小鼠ZFP580 C端编码基因cDNA序列,并进行序列测定和分析.[方法]参照GENBANK公布的C57BL/6小鼠ZFP580 eDNA序列(注册号为 AK005257),根据ZFP580 C端编码基因cDNA序列设计1对引物,采用RT-PCR技术,从C57BL/6小鼠的肾脏组织中扩增ZFP580 C端编码基因cDNA序列,回收纯化后与T载体连接,构建重组子pMD18-T-ZFP580,转化大肠杆菌DH5α.阳性克隆以限制性酶切分析与PCR法鉴定后,测定序列并分析.[结果]自C57BL/6小鼠肾脏组织获得总RNA,扩增出255 bp的基因片段,成功构建阳性克隆重组子pMD-T-ZFP580,经双酶切和PCR鉴定与预期结果一致.所测定的C57BL/6小鼠ZFP580 C端基因cDNA序列与日本RIKEN基因组中心于GENBANK注册(注册号为AK005257)的完全一致,与人ZNF580 C端编码基因cDNA序列比较.核苷酸序列同源性为90%;该cDNA序列所编码的氨基酸序列与人ZNF580基因C端比较,同源性为100%,均编码有3个串联重复的C2H2型锌指蛋白主构域.其氨基酸序列与大鼠、犬、牛比较,同源性分别为100%、100%、98%.[结论] 成功克隆C57BL/6小鼠ZFP580 C端编码基因,该基因在不同种属间高度保守.
[목적]극륭C57BL/6소서ZFP580 C단편마기인cDNA서렬,병진행서렬측정화분석.[방법]삼조GENBANK공포적C57BL/6소서ZFP580 eDNA서렬(주책호위 AK005257),근거ZFP580 C단편마기인cDNA서렬설계1대인물,채용RT-PCR기술,종C57BL/6소서적신장조직중확증ZFP580 C단편마기인cDNA서렬,회수순화후여T재체련접,구건중조자pMD18-T-ZFP580,전화대장간균DH5α.양성극륭이한제성매절분석여PCR법감정후,측정서렬병분석.[결과]자C57BL/6소서신장조직획득총RNA,확증출255 bp적기인편단,성공구건양성극륭중조자pMD-T-ZFP580,경쌍매절화PCR감정여예기결과일치.소측정적C57BL/6소서ZFP580 C단기인cDNA서렬여일본RIKEN기인조중심우GENBANK주책(주책호위AK005257)적완전일치,여인ZNF580 C단편마기인cDNA서렬비교.핵감산서렬동원성위90%;해cDNA서렬소편마적안기산서렬여인ZNF580기인C단비교,동원성위100%,균편마유3개천련중복적C2H2형자지단백주구역.기안기산서렬여대서、견、우비교,동원성분별위100%、100%、98%.[결론] 성공극륭C57BL/6소서ZFP580 C단편마기인,해기인재불동충속간고도보수.