中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2009年
1期
1-5
,共5页
颜焰%陈洪勋%李玲燕%周继勇%简子健
顏燄%陳洪勛%李玲燕%週繼勇%簡子健
안염%진홍훈%리령연%주계용%간자건
禽流感病毒%H5亚型%HA1基因%原核表达%抗原性
禽流感病毒%H5亞型%HA1基因%原覈錶達%抗原性
금류감병독%H5아형%HA1기인%원핵표체%항원성
为获得重组表达的H5亚型流感病毒血凝素(HA1)抗原.将PCR扩增的H5亚型流感病毒HA1基因克隆到原核表达载体pET-28a,构建重组原核表达质粒pETHA1-H5.结果显示,转化pETHA1-H5的大肠杆菌BL21(DE3)在IPTG的诱导下以包涵体形式表达了HA1蛋白.HA1重组蛋白能与不同禽类(鸡、鸭和鹅)H5亚型流感病毒阳性血清发生特异性反应,同时以HA1重组蛋白为抗原制备的单克隆抗体具有与H5亚型完整病毒粒子抗原反应的能力,说明重组表达的HA1蛋白保留了自然条件下H5亚型流感病毒的抗原特征.将重组表达的HA1蛋白作为ELISA抗原检测禽血清中的H5亚型流感病毒抗体,以HI试验结果为参考,两者的符合率为96.6%,证明HA1重组蛋白作为ELISA检测抗原是可行的.
為穫得重組錶達的H5亞型流感病毒血凝素(HA1)抗原.將PCR擴增的H5亞型流感病毒HA1基因剋隆到原覈錶達載體pET-28a,構建重組原覈錶達質粒pETHA1-H5.結果顯示,轉化pETHA1-H5的大腸桿菌BL21(DE3)在IPTG的誘導下以包涵體形式錶達瞭HA1蛋白.HA1重組蛋白能與不同禽類(鷄、鴨和鵝)H5亞型流感病毒暘性血清髮生特異性反應,同時以HA1重組蛋白為抗原製備的單剋隆抗體具有與H5亞型完整病毒粒子抗原反應的能力,說明重組錶達的HA1蛋白保留瞭自然條件下H5亞型流感病毒的抗原特徵.將重組錶達的HA1蛋白作為ELISA抗原檢測禽血清中的H5亞型流感病毒抗體,以HI試驗結果為參攷,兩者的符閤率為96.6%,證明HA1重組蛋白作為ELISA檢測抗原是可行的.
위획득중조표체적H5아형류감병독혈응소(HA1)항원.장PCR확증적H5아형류감병독HA1기인극륭도원핵표체재체pET-28a,구건중조원핵표체질립pETHA1-H5.결과현시,전화pETHA1-H5적대장간균BL21(DE3)재IPTG적유도하이포함체형식표체료HA1단백.HA1중조단백능여불동금류(계、압화아)H5아형류감병독양성혈청발생특이성반응,동시이HA1중조단백위항원제비적단극륭항체구유여H5아형완정병독입자항원반응적능력,설명중조표체적HA1단백보류료자연조건하H5아형류감병독적항원특정.장중조표체적HA1단백작위ELISA항원검측금혈청중적H5아형류감병독항체,이HI시험결과위삼고,량자적부합솔위96.6%,증명HA1중조단백작위ELISA검측항원시가행적.