山西大学学报（自然科学版）
山西大學學報（自然科學版）
산서대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHANXI UNIVERSITY
2009年
1期
119-124
,共6页
油松%ISSR%优化%遗传多样性
油鬆%ISSR%優化%遺傳多樣性
유송%ISSR%우화%유전다양성
以油松基因组DNA为模板,对影响ISSR-PCR的主要因素进行研究,建立了适宜于油松的ISSR-PCR优化体系及扩增程序;并采用lSSR标记对山西灵空山和陕西洛南2个油松种群的遗传多样性进行了分析,同时将此结果与使用RAPD标记的研究结果进行了对比.结果表明,在20μL反应体系中,模板DNA、Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶和引物5种主要成分的最适浓度分别为40 ng、2.5 mmol·L-1、0.20 mmol·L-1、1 U和0.5 μmol·L-1.扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30s,最适温度(54～56℃)退火45s,72℃延伸2min.共计35个循环;循环结束后72℃延伸7min,4℃保存.山西灵空山和陕西洛南2个油松种群的Nei's遗传多样性分别为0.3520和0.3514,前者的遗传多样性显著高于后者(P<0.001).使用ISSR标记与RAPD标记所获结果基本一致,但是lSSR标记优于RAPD标记.
以油鬆基因組DNA為模闆,對影響ISSR-PCR的主要因素進行研究,建立瞭適宜于油鬆的ISSR-PCR優化體繫及擴增程序;併採用lSSR標記對山西靈空山和陝西洛南2箇油鬆種群的遺傳多樣性進行瞭分析,同時將此結果與使用RAPD標記的研究結果進行瞭對比.結果錶明,在20μL反應體繫中,模闆DNA、Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚閤酶和引物5種主要成分的最適濃度分彆為40 ng、2.5 mmol·L-1、0.20 mmol·L-1、1 U和0.5 μmol·L-1.擴增程序為:94℃預變性5 min;94℃變性30s,最適溫度(54～56℃)退火45s,72℃延伸2min.共計35箇循環;循環結束後72℃延伸7min,4℃保存.山西靈空山和陝西洛南2箇油鬆種群的Nei's遺傳多樣性分彆為0.3520和0.3514,前者的遺傳多樣性顯著高于後者(P<0.001).使用ISSR標記與RAPD標記所穫結果基本一緻,但是lSSR標記優于RAPD標記.
이유송기인조DNA위모판,대영향ISSR-PCR적주요인소진행연구,건립료괄의우유송적ISSR-PCR우화체계급확증정서;병채용lSSR표기대산서령공산화협서락남2개유송충군적유전다양성진행료분석,동시장차결과여사용RAPD표기적연구결과진행료대비.결과표명,재20μL반응체계중,모판DNA、Mg2+、dNTPs、Taq DNA취합매화인물5충주요성분적최괄농도분별위40 ng、2.5 mmol·L-1、0.20 mmol·L-1、1 U화0.5 μmol·L-1.확증정서위:94℃예변성5 min;94℃변성30s,최괄온도(54～56℃)퇴화45s,72℃연신2min.공계35개순배;순배결속후72℃연신7min,4℃보존.산서령공산화협서락남2개유송충군적Nei's유전다양성분별위0.3520화0.3514,전자적유전다양성현저고우후자(P<0.001).사용ISSR표기여RAPD표기소획결과기본일치,단시lSSR표기우우RAPD표기.
