中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2010年
3期
583-587
,共5页
马旭东%黄轶群%蒋少红%郑瑞玑
馬旭東%黃軼群%蔣少紅%鄭瑞璣
마욱동%황질군%장소홍%정서기
异硫氰酸苯己酯%Molt-4细胞%组蛋白去乙酰化酶抑制剂%组蛋白甲基化%p15基因去甲基化
異硫氰痠苯己酯%Molt-4細胞%組蛋白去乙酰化酶抑製劑%組蛋白甲基化%p15基因去甲基化
이류청산분기지%Molt-4세포%조단백거을선화매억제제%조단백갑기화%p15기인거갑기화
本研究探讨异硫氰酸苯己酯(PHI)对急性T淋巴细胞性白血病Molt-4细胞组蛋白H3K4、H3K9甲基化,及p15基因的去甲基化的调控作用及诱导沉默基因重新表达的机制.用Western blot方法检测PHI作用后Molt-4细胞的组蛋白H3K4、H3K9甲基化状态及P15蛋白的表达的变化;应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测PHI作用前后Molt-4细胞株p15基因甲基化状态的变化;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Molt-4细胞经过PHI处理后p15基因的mRNA的表达变化.结果表明,PHI作用于Molt-4细胞可增强组蛋白H3K4甲基化表达,抑制组蛋白H3K9甲基化表达,并呈浓度及时间依赖性;PHI作用于Molt-4细胞5天后,p15基因的甲基化程度减弱,p15基因的异常高甲基化现象被逆转,沉默的p15基因重新表达;p15 mRNA、P15蛋白表达增加,并呈浓度依赖性.结论:PHI可能通过特异性调节组蛋白H3K4、H3K9甲基化水平,引起染色体空间结构发生变化,使p15基因的CPG岛去甲基化,从而诱导p15基因重新表达.
本研究探討異硫氰痠苯己酯(PHI)對急性T淋巴細胞性白血病Molt-4細胞組蛋白H3K4、H3K9甲基化,及p15基因的去甲基化的調控作用及誘導沉默基因重新錶達的機製.用Western blot方法檢測PHI作用後Molt-4細胞的組蛋白H3K4、H3K9甲基化狀態及P15蛋白的錶達的變化;應用甲基化特異性聚閤酶鏈反應(MSP)檢測PHI作用前後Molt-4細胞株p15基因甲基化狀態的變化;半定量逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測Molt-4細胞經過PHI處理後p15基因的mRNA的錶達變化.結果錶明,PHI作用于Molt-4細胞可增彊組蛋白H3K4甲基化錶達,抑製組蛋白H3K9甲基化錶達,併呈濃度及時間依賴性;PHI作用于Molt-4細胞5天後,p15基因的甲基化程度減弱,p15基因的異常高甲基化現象被逆轉,沉默的p15基因重新錶達;p15 mRNA、P15蛋白錶達增加,併呈濃度依賴性.結論:PHI可能通過特異性調節組蛋白H3K4、H3K9甲基化水平,引起染色體空間結構髮生變化,使p15基因的CPG島去甲基化,從而誘導p15基因重新錶達.
본연구탐토이류청산분기지(PHI)대급성T림파세포성백혈병Molt-4세포조단백H3K4、H3K9갑기화,급p15기인적거갑기화적조공작용급유도침묵기인중신표체적궤제.용Western blot방법검측PHI작용후Molt-4세포적조단백H3K4、H3K9갑기화상태급P15단백적표체적변화;응용갑기화특이성취합매련반응(MSP)검측PHI작용전후Molt-4세포주p15기인갑기화상태적변화;반정량역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측Molt-4세포경과PHI처리후p15기인적mRNA적표체변화.결과표명,PHI작용우Molt-4세포가증강조단백H3K4갑기화표체,억제조단백H3K9갑기화표체,병정농도급시간의뢰성;PHI작용우Molt-4세포5천후,p15기인적갑기화정도감약,p15기인적이상고갑기화현상피역전,침묵적p15기인중신표체;p15 mRNA、P15단백표체증가,병정농도의뢰성.결론:PHI가능통과특이성조절조단백H3K4、H3K9갑기화수평,인기염색체공간결구발생변화,사p15기인적CPG도거갑기화,종이유도p15기인중신표체.
