生物信息学
生物信息學
생물신식학
BIOINFORMATICS
2010年
3期
279-281,285
,共4页
梁乃国%崔杰%李滨胜%吴永英
樑迺國%崔傑%李濱勝%吳永英
량내국%최걸%리빈성%오영영
蛇白蔹%白藜芦醇合酶基因%克隆与序列分析%原核表达
蛇白蘞%白藜蘆醇閤酶基因%剋隆與序列分析%原覈錶達
사백렴%백려호순합매기인%극륭여서렬분석%원핵표체
白藜芦醇合酶(resveratrol synthetic enzyme,RS)是植物白藜芦醇合成途径中的关键酶,利用已知的葡萄RS基因(AF274281)序列设计并合成了一对引物,以蛇白蔹基因组DNA为模板,PCR扩增得到包含RS完整基因在内的一段序列,测序与序列分析表明:该克隆片段全长1 536bp,其中包含一个内含子及两个外显子.采用悬挂延伸PCR法克隆了目的基因,命名为CNRS2.序列分析表明该基因的开放读码框1 170 bp,编码389 个氨基酸残基.同源性比较发现,CNRS2与已知葡萄RS基因序列的同源性达93%~98%.CNRS2与pET-30a(+)构建原核表达载体,经IPTG 诱导后可表达获得相对分子量约为46 kD 的外源融合蛋白.以上结果证实 CNRS2 属葡萄RS 基因家族成员,为今后进一步对该基因的研究利用打下基础.
白藜蘆醇閤酶(resveratrol synthetic enzyme,RS)是植物白藜蘆醇閤成途徑中的關鍵酶,利用已知的葡萄RS基因(AF274281)序列設計併閤成瞭一對引物,以蛇白蘞基因組DNA為模闆,PCR擴增得到包含RS完整基因在內的一段序列,測序與序列分析錶明:該剋隆片段全長1 536bp,其中包含一箇內含子及兩箇外顯子.採用懸掛延伸PCR法剋隆瞭目的基因,命名為CNRS2.序列分析錶明該基因的開放讀碼框1 170 bp,編碼389 箇氨基痠殘基.同源性比較髮現,CNRS2與已知葡萄RS基因序列的同源性達93%~98%.CNRS2與pET-30a(+)構建原覈錶達載體,經IPTG 誘導後可錶達穫得相對分子量約為46 kD 的外源融閤蛋白.以上結果證實 CNRS2 屬葡萄RS 基因傢族成員,為今後進一步對該基因的研究利用打下基礎.
백려호순합매(resveratrol synthetic enzyme,RS)시식물백려호순합성도경중적관건매,이용이지적포도RS기인(AF274281)서렬설계병합성료일대인물,이사백렴기인조DNA위모판,PCR확증득도포함RS완정기인재내적일단서렬,측서여서렬분석표명:해극륭편단전장1 536bp,기중포함일개내함자급량개외현자.채용현괘연신PCR법극륭료목적기인,명명위CNRS2.서렬분석표명해기인적개방독마광1 170 bp,편마389 개안기산잔기.동원성비교발현,CNRS2여이지포도RS기인서렬적동원성체93%~98%.CNRS2여pET-30a(+)구건원핵표체재체,경IPTG 유도후가표체획득상대분자량약위46 kD 적외원융합단백.이상결과증실 CNRS2 속포도RS 기인가족성원,위금후진일보대해기인적연구이용타하기출.
