解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2010年
6期
837-841
,共5页
李美香%谢远杰%石金凤%赵国军%张晓红%刘月顺%龙治峰
李美香%謝遠傑%石金鳳%趙國軍%張曉紅%劉月順%龍治峰
리미향%사원걸%석금봉%조국군%장효홍%류월순%룡치봉
Perisotin%鼻咽癌%转移%基质金属蛋白酶%转染%明胶酶谱法%Boyden小室
Perisotin%鼻嚥癌%轉移%基質金屬蛋白酶%轉染%明膠酶譜法%Boyden小室
Perisotin%비인암%전이%기질금속단백매%전염%명효매보법%Boyden소실
目的 探讨Periostin表达对体外鼻咽癌(NPC)细胞侵袭行为的影响及其机制.方法 采用Western blotting检测激光捕获显微切割纯化的鼻咽癌间质和正常鼻咽黏膜间质、鼻咽癌低转移潜能细胞系6-10B和高转移潜能细胞系5-8F及NIH 3T3成纤维细胞中Periostin的表达水平.应用阳性脂质体法将pCMV-neo-Periostin质粒瞬时转染到NIH 3T3细胞,运用Western blotting检测转染前后NIH 3T3细胞中Periostin的表达水平,利用Boyden小室穿膜侵袭实验检测Periostin蛋白对肿瘤细胞的体外侵袭能力的影响,明胶酶谱法检测其对基质金属蛋白酶(MMPs)活性的影响.结果 Periostin在纯化的鼻咽癌间质中高表达,在纯化的正常鼻咽黏膜间质中及高转移细胞系5-8F中弱表达,在低转移细胞系6-10B及NIH 3T3细胞中不表达.瞬时转染过表达Periostin的NIH 3T3细胞中Periostin的表达明显增强.Boyden小室实验提示,分泌蛋白Periostin可明显增强鼻咽癌细胞6-10B的体外侵袭能力,转染组穿膜的细胞数与空白对照组及未转染对照组比较,明显增多(P<0.01);转染组与6-10B细胞共培养后,培养上清中MMPs的活性较对照组明显增强.结论 Periostin 蛋白能增强鼻咽癌细胞的侵袭能力,其机制可能与上调MMPs的活性有关.
目的 探討Periostin錶達對體外鼻嚥癌(NPC)細胞侵襲行為的影響及其機製.方法 採用Western blotting檢測激光捕穫顯微切割純化的鼻嚥癌間質和正常鼻嚥黏膜間質、鼻嚥癌低轉移潛能細胞繫6-10B和高轉移潛能細胞繫5-8F及NIH 3T3成纖維細胞中Periostin的錶達水平.應用暘性脂質體法將pCMV-neo-Periostin質粒瞬時轉染到NIH 3T3細胞,運用Western blotting檢測轉染前後NIH 3T3細胞中Periostin的錶達水平,利用Boyden小室穿膜侵襲實驗檢測Periostin蛋白對腫瘤細胞的體外侵襲能力的影響,明膠酶譜法檢測其對基質金屬蛋白酶(MMPs)活性的影響.結果 Periostin在純化的鼻嚥癌間質中高錶達,在純化的正常鼻嚥黏膜間質中及高轉移細胞繫5-8F中弱錶達,在低轉移細胞繫6-10B及NIH 3T3細胞中不錶達.瞬時轉染過錶達Periostin的NIH 3T3細胞中Periostin的錶達明顯增彊.Boyden小室實驗提示,分泌蛋白Periostin可明顯增彊鼻嚥癌細胞6-10B的體外侵襲能力,轉染組穿膜的細胞數與空白對照組及未轉染對照組比較,明顯增多(P<0.01);轉染組與6-10B細胞共培養後,培養上清中MMPs的活性較對照組明顯增彊.結論 Periostin 蛋白能增彊鼻嚥癌細胞的侵襲能力,其機製可能與上調MMPs的活性有關.
목적 탐토Periostin표체대체외비인암(NPC)세포침습행위적영향급기궤제.방법 채용Western blotting검측격광포획현미절할순화적비인암간질화정상비인점막간질、비인암저전이잠능세포계6-10B화고전이잠능세포계5-8F급NIH 3T3성섬유세포중Periostin적표체수평.응용양성지질체법장pCMV-neo-Periostin질립순시전염도NIH 3T3세포,운용Western blotting검측전염전후NIH 3T3세포중Periostin적표체수평,이용Boyden소실천막침습실험검측Periostin단백대종류세포적체외침습능력적영향,명효매보법검측기대기질금속단백매(MMPs)활성적영향.결과 Periostin재순화적비인암간질중고표체,재순화적정상비인점막간질중급고전이세포계5-8F중약표체,재저전이세포계6-10B급NIH 3T3세포중불표체.순시전염과표체Periostin적NIH 3T3세포중Periostin적표체명현증강.Boyden소실실험제시,분비단백Periostin가명현증강비인암세포6-10B적체외침습능력,전염조천막적세포수여공백대조조급미전염대조조비교,명현증다(P<0.01);전염조여6-10B세포공배양후,배양상청중MMPs적활성교대조조명현증강.결론 Periostin 단백능증강비인암세포적침습능력,기궤제가능여상조MMPs적활성유관.
