中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2011年
1期
66-68
,共3页
孙晓红%杨艳秋%贺丹%张云峰%横山耕治%王丽
孫曉紅%楊豔鞦%賀丹%張雲峰%橫山耕治%王麗
손효홍%양염추%하단%장운봉%횡산경치%왕려
假丝酵母%微卫星%聚合酶链反应%正交实验
假絲酵母%微衛星%聚閤酶鏈反應%正交實驗
가사효모%미위성%취합매련반응%정교실험
目的 建立假丝酵母SSR-PCR反应体系,确立最佳反应条件,为将该技术用于临床假丝酵母感染的快速鉴定奠定基础.方法 根据引物Tm值设立退火温度梯度,确定适宜的退火温度.利用正交实验,对影响SSR-PCR 反应体系的Taq DNA聚合酶、模板DNA、dNTP、引物等4种主要因素,进行优化.结果引物最适退火温度为51℃.假丝酵母最佳的SSR-PCR反应体系为:在25 μl的PCR反应体系中加入Taq DNA聚合酶1.0 U、模板DNA为25 ng、dNTP为0.15 mmol·L-1、引物为0.5 μmol·L-1.结论 采用正交实验优化的SSR-PCR反应体系,操作简便,电泳条带清晰,多态性好,重复性强,可为进一步建立临床假丝酵母感染的快速鉴定提供借鉴.
目的 建立假絲酵母SSR-PCR反應體繫,確立最佳反應條件,為將該技術用于臨床假絲酵母感染的快速鑒定奠定基礎.方法 根據引物Tm值設立退火溫度梯度,確定適宜的退火溫度.利用正交實驗,對影響SSR-PCR 反應體繫的Taq DNA聚閤酶、模闆DNA、dNTP、引物等4種主要因素,進行優化.結果引物最適退火溫度為51℃.假絲酵母最佳的SSR-PCR反應體繫為:在25 μl的PCR反應體繫中加入Taq DNA聚閤酶1.0 U、模闆DNA為25 ng、dNTP為0.15 mmol·L-1、引物為0.5 μmol·L-1.結論 採用正交實驗優化的SSR-PCR反應體繫,操作簡便,電泳條帶清晰,多態性好,重複性彊,可為進一步建立臨床假絲酵母感染的快速鑒定提供藉鑒.
목적 건립가사효모SSR-PCR반응체계,학립최가반응조건,위장해기술용우림상가사효모감염적쾌속감정전정기출.방법 근거인물Tm치설립퇴화온도제도,학정괄의적퇴화온도.이용정교실험,대영향SSR-PCR 반응체계적Taq DNA취합매、모판DNA、dNTP、인물등4충주요인소,진행우화.결과인물최괄퇴화온도위51℃.가사효모최가적SSR-PCR반응체계위:재25 μl적PCR반응체계중가입Taq DNA취합매1.0 U、모판DNA위25 ng、dNTP위0.15 mmol·L-1、인물위0.5 μmol·L-1.결론 채용정교실험우화적SSR-PCR반응체계,조작간편,전영조대청석,다태성호,중복성강,가위진일보건립림상가사효모감염적쾌속감정제공차감.
