CAJ | 학술논문

目的探讨高糖对小鼠足细胞podocalyxin表达的影响及结缔组织生长因子(CTGF)参与其损伤的可能机制.方法构建针对CTGF基因的特异性siRNA质粒并转染至小鼠足细胞.将体外培养的足细胞分为6组(1)正常对照组,正常足细胞其培养基含D-葡萄糖1 g/L;(2)等渗对照组,正常足细胞其培养基含D-葡萄糖1 g/L,甘露醇3.5 g/L;(3)高糖组,正常足细胞其培养基含D-葡萄糖4.5 g/L;(4)高糖+空白对照组:足细胞转染空白质粒后于高糖培养基中培养;(5)高糖+阴性对照组:足细胞转染含无关序列的重组质粒后于高糖培养基中培养;(6)高糖+干扰组:足细胞转染针对CTGF的siRNA表达质粒后于高糖培养基中培养.Western blot方法检测小鼠足细胞Podocalyxin、CTGF蛋白表达及细胞外信号调节激酶(ERK1/2)磷酸化水平.结果高糖培养足细胞24、48 h时均可下调其Podocalyxin蛋白表达量(P<0.05).并可诱导CTGF蛋白表达增加(P<0.05).同时高糖可以活化足细胞ERK1/2信号途径,在高糖刺激30 min时开始活化,持续活化至24 h.特异性siRNA干扰CTGF合成后,ERK1/2活化减少,并且足细胞Podocalyxin表达升高.结论 CTGF是高糖诱导小鼠足细胞损伤的重要介质,可通过ERK1/2途径诱导podocalyxin表达下降,针对CTGF的siRNA能明显改善podocalyxin表达量,为DN的治疗提供新的思路.
목적 탐토고당대소서족세포podocalyxin표체적영향급결체조직생장인자(CTGF)삼여기손상적가능궤제.방법 구건침대CTGF기인적특이성siRNA질립병전염지소서족세포.장체외배양적족세포분위6조(1)정상대조조,정상족세포기배양기함D-포도당1 g/L;(2)등삼대조조,정상족세포기배양기함D-포도당1 g/L,감로순3.5 g/L;(3)고당조,정상족세포기배양기함D-포도당4.5 g/L;(4)고당+공백대조조:족세포전염공백질립후우고당배양기중배양;(5)고당+음성대조조:족세포전염함무관서렬적중조질립후우고당배양기중배양;(6)고당+간우조:족세포전염침대CTGF적siRNA표체질립후우고당배양기중배양.Western blot방법검측소서족세포Podocalyxin、CTGF단백표체급세포외신호조절격매(ERK1/2)린산화수평.결과 고당배양족세포24、48 h시균가하조기Podocalyxin단백표체량(P<0.05).병가유도CTGF단백표체증가(P<0.05).동시고당가이활화족세포ERK1/2신호도경,재고당자격30 min시개시활화,지속활화지24 h.특이성siRNA간우CTGF합성후,ERK1/2활화감소,병차족세포Podocalyxin표체승고.결론 CTGF시고당유도소서족세포손상적중요개질,가통과ERK1/2도경유도podocalyxin표체하강,침대CTGF적siRNA능명현개선podocalyxin표체량,위DN적치료제공신적사로.