CAJ | 학술논문

目的 Delta-like 4(DLL4)是Notch信号通路的配体之一,是近年新发现的血管生长调控因子,研究表明DLL4的高表达与肺腺癌转移预后密切相关.该文旨在研究DLL4在A549细胞中的表达,以及DLL4基因表达对人A549细胞增殖与凋亡的影响.方法 (1)体外培养A549细胞,免疫细胞化学法检测DLL4在A549细胞中的表达及定位;(2)设计并化学合成靶向DLL4基因的siRNA序列,lipofectamineTM2000介导DLL4 siRNA转染A549细胞,RT-PCR进行DLL4-mRNA定量,Western blot分别检测A549细胞DLL4蛋白的改变;(3)四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞的存活和生长变化;(4)激光共聚焦显微镜检测Annexin V-FITC标记的A549细胞的细胞凋亡比率.结果 (1)A549细胞表达DLL4蛋白,且定位于胞浆中;(2)DLL4-mRNA和DLL4蛋白的表达在对照组与干扰组之间有显著差异(P<0.05);(3)MTT检测显示抑制DLL4表达对A549细胞的增殖有抑制作用,DLL4干扰组细胞增殖抑制率为43.85%,未处理组细胞增殖抑制率为23.81%;(4)抑制DLL4基因表达,A549细胞的凋亡比率明显升高,DLL4干扰组细胞凋亡率为(25.01±4.32)%,未处理组细胞凋亡率为(14.24±0.98)%.结论 DLL4在A549细胞表达.特异性阻断DLL4/Notch信号途径能有效抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡.
목적 Delta-like 4(DLL4)시Notch신호통로적배체지일,시근년신발현적혈관생장조공인자,연구표명DLL4적고표체여폐선암전이예후밀절상관.해문지재연구DLL4재A549세포중적표체,이급DLL4기인표체대인A549세포증식여조망적영향.방법 (1)체외배양A549세포,면역세포화학법검측DLL4재A549세포중적표체급정위;(2)설계병화학합성파향DLL4기인적siRNA서렬,lipofectamineTM2000개도DLL4 siRNA전염A549세포,RT-PCR진행DLL4-mRNA정량,Western blot분별검측A549세포DLL4단백적개변;(3)사갑기우담서염(MTT)비색법검측세포적존활화생장변화;(4)격광공취초현미경검측Annexin V-FITC표기적A549세포적세포조망비솔.결과 (1)A549세포표체DLL4단백,차정위우포장중;(2)DLL4-mRNA화DLL4단백적표체재대조조여간우조지간유현저차이(P<0.05);(3)MTT검측현시억제DLL4표체대A549세포적증식유억제작용,DLL4간우조세포증식억제솔위43.85%,미처리조세포증식억제솔위23.81%;(4)억제DLL4기인표체,A549세포적조망비솔명현승고,DLL4간우조세포조망솔위(25.01±4.32)%,미처리조세포조망솔위(14.24±0.98)%.결론 DLL4재A549세포표체.특이성조단DLL4/Notch신호도경능유효억제A549세포증식,촉진세포조망.