畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2012年
9期
1449-1454
,共6页
宋菲菲%康震%齐艳君%袁颖烁%张守峰%张乐萃%扈荣良
宋菲菲%康震%齊豔君%袁穎爍%張守峰%張樂萃%扈榮良
송비비%강진%제염군%원영삭%장수봉%장악췌%호영량
鸡传染性支气管炎病毒%S1蛋白%人5型腺病毒载体%免疫原性
鷄傳染性支氣管炎病毒%S1蛋白%人5型腺病毒載體%免疫原性
계전염성지기관염병독%S1단백%인5형선병독재체%면역원성
拟构建表达鸡传染性支气管炎病毒(IBV)QS10株S1蛋白的重组复制缺陷型人5型腺病毒,并在本动物上进行初步的免疫学试验.通过RT-PCR获得S1基因,插入腺病毒表达系统穿梭质粒,构建重组穿梭质粒pac-Ad5 CMV-S1,转染293AD细胞获得表达S1蛋白的重组腺病毒.PCR检测显示,S1基因已重组到腺病毒基因组；间接免疫荧光和Western blot检测证明该重组病毒在293AD细胞中真实表达了具有免疫反应性的IBV S1糖蛋白.重组病毒培养滴度可达到107 TCID50·mL-1.免疫接种SPF鸡后,通过ELISA检测,免疫鸡产生了针对IBV的特异性抗体.作者成功构建了表达IBV S1蛋白的重组腺病毒,该重组病毒可在SPF鸡体内诱导产生IBV特异性抗体.
擬構建錶達鷄傳染性支氣管炎病毒(IBV)QS10株S1蛋白的重組複製缺陷型人5型腺病毒,併在本動物上進行初步的免疫學試驗.通過RT-PCR穫得S1基因,插入腺病毒錶達繫統穿梭質粒,構建重組穿梭質粒pac-Ad5 CMV-S1,轉染293AD細胞穫得錶達S1蛋白的重組腺病毒.PCR檢測顯示,S1基因已重組到腺病毒基因組；間接免疫熒光和Western blot檢測證明該重組病毒在293AD細胞中真實錶達瞭具有免疫反應性的IBV S1糖蛋白.重組病毒培養滴度可達到107 TCID50·mL-1.免疫接種SPF鷄後,通過ELISA檢測,免疫鷄產生瞭針對IBV的特異性抗體.作者成功構建瞭錶達IBV S1蛋白的重組腺病毒,該重組病毒可在SPF鷄體內誘導產生IBV特異性抗體.
의구건표체계전염성지기관염병독(IBV)QS10주S1단백적중조복제결함형인5형선병독,병재본동물상진행초보적면역학시험.통과RT-PCR획득S1기인,삽입선병독표체계통천사질립,구건중조천사질립pac-Ad5 CMV-S1,전염293AD세포획득표체S1단백적중조선병독.PCR검측현시,S1기인이중조도선병독기인조；간접면역형광화Western blot검측증명해중조병독재293AD세포중진실표체료구유면역반응성적IBV S1당단백.중조병독배양적도가체도107 TCID50·mL-1.면역접충SPF계후,통과ELISA검측,면역계산생료침대IBV적특이성항체.작자성공구건료표체IBV S1단백적중조선병독,해중조병독가재SPF계체내유도산생IBV특이성항체.
