免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2006年
4期
377-380
,共4页
代吕霞%祁志荣%李明远%蒋中华%张林%李虹
代呂霞%祁誌榮%李明遠%蔣中華%張林%李虹
대려하%기지영%리명원%장중화%장림%리홍
γ-干扰素诱导蛋白-10%克隆%原核表达
γ-榦擾素誘導蛋白-10%剋隆%原覈錶達
γ-간우소유도단백-10%극륭%원핵표체
目的原核表达大鼠γ-干扰素诱导蛋白-10,并对其进行鉴定.方法从大鼠脾细胞中提取RNA,用RT-PCR方法得到IP-10cDNA,双酶切将其插入pET-32a(+)载体中.重组质粒pET-32a(+)-IP-10经酶切、PCR及测序鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达.结果所获得的大鼠IP-10克隆,经测序与GenBank报道的完全一致.所表达的产物经SDS-PAGE和Wes-tern blot分析获得证实.结论已成功构建原核表达载体pET-32a(+)-IP-10,并使其在大肠杆菌中获得了融合表达.
目的原覈錶達大鼠γ-榦擾素誘導蛋白-10,併對其進行鑒定.方法從大鼠脾細胞中提取RNA,用RT-PCR方法得到IP-10cDNA,雙酶切將其插入pET-32a(+)載體中.重組質粒pET-32a(+)-IP-10經酶切、PCR及測序鑒定後轉化大腸桿菌BL21(DE3)中進行錶達.結果所穫得的大鼠IP-10剋隆,經測序與GenBank報道的完全一緻.所錶達的產物經SDS-PAGE和Wes-tern blot分析穫得證實.結論已成功構建原覈錶達載體pET-32a(+)-IP-10,併使其在大腸桿菌中穫得瞭融閤錶達.
목적원핵표체대서γ-간우소유도단백-10,병대기진행감정.방법종대서비세포중제취RNA,용RT-PCR방법득도IP-10cDNA,쌍매절장기삽입pET-32a(+)재체중.중조질립pET-32a(+)-IP-10경매절、PCR급측서감정후전화대장간균BL21(DE3)중진행표체.결과소획득적대서IP-10극륭,경측서여GenBank보도적완전일치.소표체적산물경SDS-PAGE화Wes-tern blot분석획득증실.결론이성공구건원핵표체재체pET-32a(+)-IP-10,병사기재대장간균중획득료융합표체.
