华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2007年
4期
504-506,559-560
,共5页
杜鹏%王春雷%徐运兰%喻志源%谢敏杰%王伟
杜鵬%王春雷%徐運蘭%喻誌源%謝敏傑%王偉
두붕%왕춘뢰%서운란%유지원%사민걸%왕위
子宫内电转染%基因转染%小鼠
子宮內電轉染%基因轉染%小鼠
자궁내전전염%기인전염%소서
目的 借助生物物理技术建立一种高效实用的脑内基因转染技术,探讨其在神经科学研究中的应用.方法 选取孕15 d C57系小鼠,取出子宫角,用自制玻璃电极将目的质粒和荧光质粒混匀后注入胎鼠侧脑室,应用BTX电转染仪在胎鼠脑两颞极间给予设定的电脉冲刺激,后将胎鼠放入孕鼠腹腔让其自然出生后8 d取脑,冰冻切片,抗GFP、抗Tubulin免疫组化染色,荧光显微镜下观察.结果 在小鼠大脑皮层Ⅱ、Ⅲ层,转染CAG-EGFP的脑片可见绿色荧光细胞带,转染细胞抗GFP免疫组化染色阳性;转染DS-red的呈红色荧光细胞带,转染细胞均呈抗Tubulin免疫组化染色阳性.结论 子宫内胚胎电转染技术是一个很好的在体基因转染技术,可为神经科学研究提供一个很好的技术平台.
目的 藉助生物物理技術建立一種高效實用的腦內基因轉染技術,探討其在神經科學研究中的應用.方法 選取孕15 d C57繫小鼠,取齣子宮角,用自製玻璃電極將目的質粒和熒光質粒混勻後註入胎鼠側腦室,應用BTX電轉染儀在胎鼠腦兩顳極間給予設定的電脈遲刺激,後將胎鼠放入孕鼠腹腔讓其自然齣生後8 d取腦,冰凍切片,抗GFP、抗Tubulin免疫組化染色,熒光顯微鏡下觀察.結果 在小鼠大腦皮層Ⅱ、Ⅲ層,轉染CAG-EGFP的腦片可見綠色熒光細胞帶,轉染細胞抗GFP免疫組化染色暘性;轉染DS-red的呈紅色熒光細胞帶,轉染細胞均呈抗Tubulin免疫組化染色暘性.結論 子宮內胚胎電轉染技術是一箇很好的在體基因轉染技術,可為神經科學研究提供一箇很好的技術平檯.
목적 차조생물물리기술건립일충고효실용적뇌내기인전염기술,탐토기재신경과학연구중적응용.방법 선취잉15 d C57계소서,취출자궁각,용자제파리전겁장목적질립화형광질립혼균후주입태서측뇌실,응용BTX전전염의재태서뇌량섭겁간급여설정적전맥충자격,후장태서방입잉서복강양기자연출생후8 d취뇌,빙동절편,항GFP、항Tubulin면역조화염색,형광현미경하관찰.결과 재소서대뇌피층Ⅱ、Ⅲ층,전염CAG-EGFP적뇌편가견록색형광세포대,전염세포항GFP면역조화염색양성;전염DS-red적정홍색형광세포대,전염세포균정항Tubulin면역조화염색양성.결론 자궁내배태전전염기술시일개흔호적재체기인전염기술,가위신경과학연구제공일개흔호적기술평태.
