CAJ | 학술논문

为获得狂犬病病毒(rabies virus,RV)SRV9株的基因组全长cDNA克隆并对其进行基因修饰,深入研究狂犬病病毒的基因组特性及构建新型病毒载体,本研究根据GenBank中公布的SRV9基因组序列设计数对引物,以SRV9病毒为材料,从病毒总RNA中将全长基因组11 928 bp分5段扩增,克隆至载体测序鉴定.测序正确后,设计引物缺失基因组Ψ区并在缺失位置插入人细胞色素C基因,又设计引物删除糖蛋白(G)胞质区(CD区).利用引物在病毒基因组起始处添加锤头状核酶序列,在病毒序列结尾处添加了丁型肝炎核酶序列.再次测序后克隆至pcDNA3.1(+)载体,利用扩增片段自身内切酶位点顺次进行修饰后全长连接,从而获得含修饰SRV9全长基因组的质粒pcDNA3.1-SRV9,为RV感染性克隆的建立奠定了基础.
위획득광견병병독(rabies virus,RV)SRV9주적기인조전장cDNA극륭병대기진행기인수식,심입연구광견병병독적기인조특성급구건신형병독재체,본연구근거GenBank중공포적SRV9기인조서렬설계수대인물,이SRV9병독위재료,종병독총RNA중장전장기인조11 928 bp분5단확증,극륭지재체측서감정.측서정학후,설계인물결실기인조Ψ구병재결실위치삽입인세포색소C기인,우설계인물산제당단백(G)포질구(CD구).이용인물재병독기인조기시처첨가추두상핵매서렬,재병독서렬결미처첨가료정형간염핵매서렬.재차측서후극륭지pcDNA3.1(+)재체,이용확증편단자신내절매위점순차진행수식후전장련접,종이획득함수식SRV9전장기인조적질립pcDNA3.1-SRV9,위RV감염성극륭적건립전정료기출.