中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2010年
11期
2246-2252
,共7页
潘思年%张成喜%李燕虹%马华梅%朱顺叶%杜敏联
潘思年%張成喜%李燕虹%馬華梅%硃順葉%杜敏聯
반사년%장성희%리연홍%마화매%주순협%두민련
生长激素%促性腺激素释放激素%受体,表皮生长因子%骨骺生长板
生長激素%促性腺激素釋放激素%受體,錶皮生長因子%骨骺生長闆
생장격소%촉성선격소석방격소%수체,표피생장인자%골후생장판
目的:观察促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)处理后青春期大鼠生长板体外培养的软骨细胞内是否存在生长激素(GH)与表皮生长因子受体(EGFR)之间的信号交联(cross-talk).方法:3周龄雌性SD大鼠开始注射GnRHa至7周龄;随后分离培养5-8只大鼠胫骨生长板软骨细胞,在GH作用前分别加入JAK2阻断剂AG490(1 nmol/L、10 nmol/L和100 nmol/L)、EGFR酪氨酸激酶阻断剂AG1478(0 1 nmol/L、1 nmol/L和10 nmol/L)和表皮生长因子(EGF)中和抗体(0.1 mg/L、1 mg/L和10 mg/L);采用四氮甲基唑蓝(MTT)以及免疫组化法测定增殖细胞核抗原(PCNA),观察不同阻断剂对软骨细胞增殖的影响;采用Western blotting检测软骨细胞p-ERK1/2及p-EGFR的表达.结果:GH作用后具有浓度依赖性地促进软骨细胞增殖和增加p-ERK1/2及p-EGFR水平的作用,100 μg/L时作用最为明显.AG490及AG1478几乎能完全抑制GH促进软骨细胞增殖和激活ERK1/2及EGFR的作用. 而EGF中和抗体仅能部分抑制GH的作用.结论:GH通过激活JAK2而激活其下游的ERK通路,实现其直接促细胞增殖效应.GH亦能通过激活EGFR及其信号转导通路促进细胞增殖效应,表明GH通路和EGF通路间存在相互作用.
目的:觀察促性腺激素釋放激素類似物(GnRHa)處理後青春期大鼠生長闆體外培養的軟骨細胞內是否存在生長激素(GH)與錶皮生長因子受體(EGFR)之間的信號交聯(cross-talk).方法:3週齡雌性SD大鼠開始註射GnRHa至7週齡;隨後分離培養5-8隻大鼠脛骨生長闆軟骨細胞,在GH作用前分彆加入JAK2阻斷劑AG490(1 nmol/L、10 nmol/L和100 nmol/L)、EGFR酪氨痠激酶阻斷劑AG1478(0 1 nmol/L、1 nmol/L和10 nmol/L)和錶皮生長因子(EGF)中和抗體(0.1 mg/L、1 mg/L和10 mg/L);採用四氮甲基唑藍(MTT)以及免疫組化法測定增殖細胞覈抗原(PCNA),觀察不同阻斷劑對軟骨細胞增殖的影響;採用Western blotting檢測軟骨細胞p-ERK1/2及p-EGFR的錶達.結果:GH作用後具有濃度依賴性地促進軟骨細胞增殖和增加p-ERK1/2及p-EGFR水平的作用,100 μg/L時作用最為明顯.AG490及AG1478幾乎能完全抑製GH促進軟骨細胞增殖和激活ERK1/2及EGFR的作用. 而EGF中和抗體僅能部分抑製GH的作用.結論:GH通過激活JAK2而激活其下遊的ERK通路,實現其直接促細胞增殖效應.GH亦能通過激活EGFR及其信號轉導通路促進細胞增殖效應,錶明GH通路和EGF通路間存在相互作用.
목적:관찰촉성선격소석방격소유사물(GnRHa)처리후청춘기대서생장판체외배양적연골세포내시부존재생장격소(GH)여표피생장인자수체(EGFR)지간적신호교련(cross-talk).방법:3주령자성SD대서개시주사GnRHa지7주령;수후분리배양5-8지대서경골생장판연골세포,재GH작용전분별가입JAK2조단제AG490(1 nmol/L、10 nmol/L화100 nmol/L)、EGFR락안산격매조단제AG1478(0 1 nmol/L、1 nmol/L화10 nmol/L)화표피생장인자(EGF)중화항체(0.1 mg/L、1 mg/L화10 mg/L);채용사담갑기서람(MTT)이급면역조화법측정증식세포핵항원(PCNA),관찰불동조단제대연골세포증식적영향;채용Western blotting검측연골세포p-ERK1/2급p-EGFR적표체.결과:GH작용후구유농도의뢰성지촉진연골세포증식화증가p-ERK1/2급p-EGFR수평적작용,100 μg/L시작용최위명현.AG490급AG1478궤호능완전억제GH촉진연골세포증식화격활ERK1/2급EGFR적작용. 이EGF중화항체부능부분억제GH적작용.결론:GH통과격활JAK2이격활기하유적ERK통로,실현기직접촉세포증식효응.GH역능통과격활EGFR급기신호전도통로촉진세포증식효응,표명GH통로화EGF통로간존재상호작용.
