中国环境科学
中國環境科學
중국배경과학
CHINA ENVIRONMENTAL SCIENCE
2010年
10期
1395-1401
,共7页
王中康%田远明%廖强%张宝鹏%殷幼平
王中康%田遠明%廖彊%張寶鵬%慇幼平
왕중강%전원명%료강%장보붕%은유평
沼泽红假单胞菌%自杀载体%基因敲除%生物产氢%吸氢酶%聚羟基丁酸酯合成酶
沼澤紅假單胞菌%自殺載體%基因敲除%生物產氫%吸氫酶%聚羥基丁痠酯閤成酶
소택홍가단포균%자살재체%기인고제%생물산경%흡경매%취간기정산지합성매
利用湖底淤泥分离的沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)CQU01和该菌株的吸氢酶基因hupL缺失菌株CQU012作为出发菌株,分别构建聚羟基丁酸酯合成酶基因phbC单突变株及聚羟基丁酸酯合成酶基因phbC与吸氧酶基因hupL双突变株,以提高其在光照培养条件下的产氧量.以同源重组双交换方法构建含有Em抗性基因的自杀载体,通过接合转移转化尼R.palustris CQU01菌株,经PCR扩增以及测序验证,成功获得了沼泽红假单胞菌phbC单突变株R.palustris CQU013及phbC-hupL双突变株R.palustris CQU014.相同条件下测定突变菌株与野生菌株的生长和产氧特性,结果显示,突变菌株生长曲线与野生菌株有明显差异,两株突变菌株的产氢量分别是原始菌株的1.31和1.76倍,达到454mL/L和604mL/L.双突变菌株产氢能力较phbC基因和hupL基因单突变菌株的产氢能力有明显提高,说明phbC和hupL基因对菌株R.palustris 的产氧代谢有着显著的影响.
利用湖底淤泥分離的沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)CQU01和該菌株的吸氫酶基因hupL缺失菌株CQU012作為齣髮菌株,分彆構建聚羥基丁痠酯閤成酶基因phbC單突變株及聚羥基丁痠酯閤成酶基因phbC與吸氧酶基因hupL雙突變株,以提高其在光照培養條件下的產氧量.以同源重組雙交換方法構建含有Em抗性基因的自殺載體,通過接閤轉移轉化尼R.palustris CQU01菌株,經PCR擴增以及測序驗證,成功穫得瞭沼澤紅假單胞菌phbC單突變株R.palustris CQU013及phbC-hupL雙突變株R.palustris CQU014.相同條件下測定突變菌株與野生菌株的生長和產氧特性,結果顯示,突變菌株生長麯線與野生菌株有明顯差異,兩株突變菌株的產氫量分彆是原始菌株的1.31和1.76倍,達到454mL/L和604mL/L.雙突變菌株產氫能力較phbC基因和hupL基因單突變菌株的產氫能力有明顯提高,說明phbC和hupL基因對菌株R.palustris 的產氧代謝有著顯著的影響.
이용호저어니분리적소택홍가단포균(Rhodopseudomonas palustris)CQU01화해균주적흡경매기인hupL결실균주CQU012작위출발균주,분별구건취간기정산지합성매기인phbC단돌변주급취간기정산지합성매기인phbC여흡양매기인hupL쌍돌변주,이제고기재광조배양조건하적산양량.이동원중조쌍교환방법구건함유Em항성기인적자살재체,통과접합전이전화니R.palustris CQU01균주,경PCR확증이급측서험증,성공획득료소택홍가단포균phbC단돌변주R.palustris CQU013급phbC-hupL쌍돌변주R.palustris CQU014.상동조건하측정돌변균주여야생균주적생장화산양특성,결과현시,돌변균주생장곡선여야생균주유명현차이,량주돌변균주적산경량분별시원시균주적1.31화1.76배,체도454mL/L화604mL/L.쌍돌변균주산경능력교phbC기인화hupL기인단돌변균주적산경능력유명현제고,설명phbC화hupL기인대균주R.palustris 적산양대사유착현저적영향.
