CAJ | 학술논문

目的:为克服传统显微镜检微核(micronucleus,MN)方法耗时、费力、主观等缺点,建立基于CD71、CD61荧光抗体和碘化丙啶(cyclophosphamidr,PI)的三色流式细胞术(flow cytometry,FCM)研究小鼠外周血微核的自动化检测方法.方法:经口单次给予小鼠0、20、40和80 mg/kg环磷酰胺(CP),于不同时间点收集外周血;另一批小鼠给予CP 40 mg(kg·d)经口灌胃,连续染毒5d,分别于给药前和每次给药后24 h收集外周血.采用-80℃甲醇固定血细胞,CD71、CD61荧光抗体、RNA酶和PI孵育血细胞,以疟原虫感染的红细胞作为生物标准物调校FCM后,对CP诱导的小鼠外周血中含MN的CD71<'+>网织红细胞(reticulocytes,RET)进行检测.结果:单次染毒后48 h MN-RET达峰值,且MN-RET呈现明显的剂量依赖性增加(r=0.984 9,P<0.01);重复染毒5 d,FCM监测的HN-RET染毒2 d后达到稳态水平.FCM检测的MN-RET峰值和稳态水平与常规显微镜观察的骨髓微核率有良好的相关性(r=0.9212,P<0.01).结论:FCM小鼠外周血微核法稳定可靠,可以作为常规显微镜小鼠骨髓阅片法的替代方法,用于小鼠体内微核试验.
목적:위극복전통현미경검미핵(micronucleus,MN)방법모시、비력、주관등결점,건립기우CD71、CD61형광항체화전화병정(cyclophosphamidr,PI)적삼색류식세포술(flow cytometry,FCM)연구소서외주혈미핵적자동화검측방법.방법:경구단차급여소서0、20、40화80 mg/kg배린선알(CP),우불동시간점수집외주혈;령일비소서급여CP 40 mg(kg·d)경구관위,련속염독5d,분별우급약전화매차급약후24 h수집외주혈.채용-80℃갑순고정혈세포,CD71、CD61형광항체、RNA매화PI부육혈세포,이학원충감염적홍세포작위생물표준물조교FCM후,대CP유도적소서외주혈중함MN적CD71<'+>망직홍세포(reticulocytes,RET)진행검측.결과:단차염독후48 h MN-RET체봉치,차MN-RET정현명현적제량의뢰성증가(r=0.984 9,P<0.01);중복염독5 d,FCM감측적HN-RET염독2 d후체도은태수평.FCM검측적MN-RET봉치화은태수평여상규현미경관찰적골수미핵솔유량호적상관성(r=0.9212,P<0.01).결론:FCM소서외주혈미핵법은정가고,가이작위상규현미경소서골수열편법적체대방법,용우소서체내미핵시험.