中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2011年
6期
1243-1249
,共7页
陈华增%李健%王清印%何玉英%李吉涛%戴芳钰%王学忠
陳華增%李健%王清印%何玉英%李吉濤%戴芳鈺%王學忠
진화증%리건%왕청인%하옥영%리길도%대방옥%왕학충
中国明对虾%氨氮%pH%SRAP%分群分析法%抗逆性状
中國明對蝦%氨氮%pH%SRAP%分群分析法%抗逆性狀
중국명대하%안담%pH%SRAP%분군분석법%항역성상
采用序列相关扩增多态性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)分子标记技术,结合分群分析法(bulk segregate analysis,BSA)对中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)高氨氮和高pH胁迫敏感组和耐受组进行分析研究,筛选出与高氨氮或高pH耐受性相关的遗传标记.应用110对SRAP引物进行筛选研究,根据在BSA基因池产生的差异,筛选出与高氨氮耐受相关引物77对,与高pH耐受相关引物102对,以用于验证分析.根据片段在群体中出现频率和变化规律,筛选出6个可能与高氨氮耐受性相关的分子遗传标记,其中耐受高氨氮负相关标记1个,正相关标记5个;7个可能与高pH耐受性相关的分子遗传标记,其中耐受高pH负相关标记2个,正相关标记5个.对获得的13个序列片段进行回收,连接于pMD-18T载体后转化于大肠杆菌TOP10感受态细胞,进行了克隆和测序.将测序结果进行了BLAST分析比对,发现测得片段序列与数据库中序列同源性较低(一般都低于15%),未找到与之同源性较高的功能基因,推论这些特异性序列片段标记可能与高氨氮或高pH耐受性性状密切相关,后续群体验证工作正在进行,以期筛选出与中国明对虾抗逆性状密切相关的序列特征性片段扩增区域(sequence characterized amplified region,SCAR)分子标记,为分子标记辅助育种提供技术支持.
採用序列相關擴增多態性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)分子標記技術,結閤分群分析法(bulk segregate analysis,BSA)對中國明對蝦(Fenneropenaeus chinensis)高氨氮和高pH脅迫敏感組和耐受組進行分析研究,篩選齣與高氨氮或高pH耐受性相關的遺傳標記.應用110對SRAP引物進行篩選研究,根據在BSA基因池產生的差異,篩選齣與高氨氮耐受相關引物77對,與高pH耐受相關引物102對,以用于驗證分析.根據片段在群體中齣現頻率和變化規律,篩選齣6箇可能與高氨氮耐受性相關的分子遺傳標記,其中耐受高氨氮負相關標記1箇,正相關標記5箇;7箇可能與高pH耐受性相關的分子遺傳標記,其中耐受高pH負相關標記2箇,正相關標記5箇.對穫得的13箇序列片段進行迴收,連接于pMD-18T載體後轉化于大腸桿菌TOP10感受態細胞,進行瞭剋隆和測序.將測序結果進行瞭BLAST分析比對,髮現測得片段序列與數據庫中序列同源性較低(一般都低于15%),未找到與之同源性較高的功能基因,推論這些特異性序列片段標記可能與高氨氮或高pH耐受性性狀密切相關,後續群體驗證工作正在進行,以期篩選齣與中國明對蝦抗逆性狀密切相關的序列特徵性片段擴增區域(sequence characterized amplified region,SCAR)分子標記,為分子標記輔助育種提供技術支持.
채용서렬상관확증다태성(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)분자표기기술,결합분군분석법(bulk segregate analysis,BSA)대중국명대하(Fenneropenaeus chinensis)고안담화고pH협박민감조화내수조진행분석연구,사선출여고안담혹고pH내수성상관적유전표기.응용110대SRAP인물진행사선연구,근거재BSA기인지산생적차이,사선출여고안담내수상관인물77대,여고pH내수상관인물102대,이용우험증분석.근거편단재군체중출현빈솔화변화규률,사선출6개가능여고안담내수성상관적분자유전표기,기중내수고안담부상관표기1개,정상관표기5개;7개가능여고pH내수성상관적분자유전표기,기중내수고pH부상관표기2개,정상관표기5개.대획득적13개서렬편단진행회수,련접우pMD-18T재체후전화우대장간균TOP10감수태세포,진행료극륭화측서.장측서결과진행료BLAST분석비대,발현측득편단서렬여수거고중서렬동원성교저(일반도저우15%),미조도여지동원성교고적공능기인,추론저사특이성서렬편단표기가능여고안담혹고pH내수성성상밀절상관,후속군체험증공작정재진행,이기사선출여중국명대하항역성상밀절상관적서렬특정성편단확증구역(sequence characterized amplified region,SCAR)분자표기,위분자표기보조육충제공기술지지.