重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2012年
27期
2793-2795,2798,封2
,共5页
孔令胜%苗建美%靳峰%郭强%张浩
孔令勝%苗建美%靳峰%郭彊%張浩
공령성%묘건미%근봉%곽강%장호
脊髓损伤%转染%干细胞移植%低氧诱导因子%红核神经元
脊髓損傷%轉染%榦細胞移植%低氧誘導因子%紅覈神經元
척수손상%전염%간세포이식%저양유도인자%홍핵신경원
目的 研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因转导的神经干细胞(NSCs)移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后红核神经元损伤的影响.方法 采用电控SCI打击装置制作大鼠SCI模型.将80只SD大鼠随机分为4组:对照组、SCI组、NSCs组、基因修饰移植组(HIF-NSC组).5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法标记处于对数生长期的NSCs,SCI后即刻进行NSCs及HIF-1α基因转导的NSCs移植.应用免疫组化法观察BrdU标记的移植细胞的存活、迁移情况以及HIF-1α的表达,用辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪技术标记红核神经元,用四甲基联苯胺(TMB)呈色反应显示红核脊髓束神经元的存活情况,采用斜板试验(改良Rivlin法)观察大鼠后肢运动功能的恢复情况.结果 NSCs组与HIF-NSC组在损伤脊髓区域均可检测到BrdU标记的阳性NSCs;HIF-NSC组中HIF-1α免疫阳性细胞平均光密度(OD)值比其他各组各时间点均高(P<0.01),且表达高峰延迟至移植后14 d;中脑HRP标记红核神经元数目明显多于NSCs组、SCI组(P<0.01);移植后第7、14、28天,HIF-NSC组后肢运动功能评分比NSCs组、SCI组明显升高(P<0.01).结论 HIF-1α基因体外转导的胚鼠NSCs移植到SCI区域后可以存活、迁移,且能明显的上调HIF-1α的表达、减轻红核神经元的逆行性损伤,从而促进大鼠后肢运动功能的恢复.
目的 研究低氧誘導因子-1α(HIF-1α)基因轉導的神經榦細胞(NSCs)移植對大鼠脊髓損傷(SCI)後紅覈神經元損傷的影響.方法 採用電控SCI打擊裝置製作大鼠SCI模型.將80隻SD大鼠隨機分為4組:對照組、SCI組、NSCs組、基因脩飾移植組(HIF-NSC組).5-溴脫氧尿嘧啶覈苷(BrdU)法標記處于對數生長期的NSCs,SCI後即刻進行NSCs及HIF-1α基因轉導的NSCs移植.應用免疫組化法觀察BrdU標記的移植細胞的存活、遷移情況以及HIF-1α的錶達,用辣根過氧化物酶(HRP)逆行示蹤技術標記紅覈神經元,用四甲基聯苯胺(TMB)呈色反應顯示紅覈脊髓束神經元的存活情況,採用斜闆試驗(改良Rivlin法)觀察大鼠後肢運動功能的恢複情況.結果 NSCs組與HIF-NSC組在損傷脊髓區域均可檢測到BrdU標記的暘性NSCs;HIF-NSC組中HIF-1α免疫暘性細胞平均光密度(OD)值比其他各組各時間點均高(P<0.01),且錶達高峰延遲至移植後14 d;中腦HRP標記紅覈神經元數目明顯多于NSCs組、SCI組(P<0.01);移植後第7、14、28天,HIF-NSC組後肢運動功能評分比NSCs組、SCI組明顯升高(P<0.01).結論 HIF-1α基因體外轉導的胚鼠NSCs移植到SCI區域後可以存活、遷移,且能明顯的上調HIF-1α的錶達、減輕紅覈神經元的逆行性損傷,從而促進大鼠後肢運動功能的恢複.
목적 연구저양유도인자-1α(HIF-1α)기인전도적신경간세포(NSCs)이식대대서척수손상(SCI)후홍핵신경원손상적영향.방법 채용전공SCI타격장치제작대서SCI모형.장80지SD대서수궤분위4조:대조조、SCI조、NSCs조、기인수식이식조(HIF-NSC조).5-추탈양뇨밀정핵감(BrdU)법표기처우대수생장기적NSCs,SCI후즉각진행NSCs급HIF-1α기인전도적NSCs이식.응용면역조화법관찰BrdU표기적이식세포적존활、천이정황이급HIF-1α적표체,용랄근과양화물매(HRP)역행시종기술표기홍핵신경원,용사갑기련분알(TMB)정색반응현시홍핵척수속신경원적존활정황,채용사판시험(개량Rivlin법)관찰대서후지운동공능적회복정황.결과 NSCs조여HIF-NSC조재손상척수구역균가검측도BrdU표기적양성NSCs;HIF-NSC조중HIF-1α면역양성세포평균광밀도(OD)치비기타각조각시간점균고(P<0.01),차표체고봉연지지이식후14 d;중뇌HRP표기홍핵신경원수목명현다우NSCs조、SCI조(P<0.01);이식후제7、14、28천,HIF-NSC조후지운동공능평분비NSCs조、SCI조명현승고(P<0.01).결론 HIF-1α기인체외전도적배서NSCs이식도SCI구역후가이존활、천이,차능명현적상조HIF-1α적표체、감경홍핵신경원적역행성손상,종이촉진대서후지운동공능적회복.