CAJ | 학술논문

目的比较淋巴细胞分离液(LS)、Percoll液(PS)和Nycodenz液(NS)同步分离培养大鼠肝枯否细胞(KC)和星状细胞(HSC)的优缺点.方法 ①采用链酶蛋白酶E、胶原酶Ⅳ联合原位灌流消化,分别以LS、PS和NS的非连续密度梯度离心法同步分离培养大鼠KC和HSC.②碳素墨汁吞噬试验鉴定KC;α-SMA免疫细胞化学染色法鉴定HSC.③倒置相差显微镜下观测细胞形态,台盼蓝染色显示细胞活性,计数后计算细胞的得率、存活率和纯度.结果体外成功地同步分离培养了KC和HSC;培养的KC吞噬功能明显,而传代HSC α-SMA免疫细胞化学染色阳性者几乎达100%;采用PS或NS体外同步分离KC的细胞得率和纯度均显著高于采用LS分离细胞所得(P<0.01),而采用NS体外同步分离肝KC的细胞存活率显著高于PS或LS分离细胞的存活率(P<0.05);分别采用LS、PS和NS同步分离HSC,三者的细胞存活率逐次升高(P<0.05或P<0.01),而使用LS同步分离的细胞虽然细胞得率比较高(P<0.05),但其细胞纯度较使用PS和NS明显降低(P<0.05),PS和NS分离获得的HSC得率和纯度均无明显统计学差异.结论采用Percoll液和Nycodenz液体外同步分离培养大鼠肝KC和HSC效果好,且后者的细胞存活率最高.
목적 비교림파세포분리액(LS)、Percoll액(PS)화Nycodenz액(NS)동보분리배양대서간고부세포(KC)화성상세포(HSC)적우결점.방법 ①채용련매단백매E、효원매Ⅳ연합원위관류소화,분별이LS、PS화NS적비련속밀도제도리심법동보분리배양대서KC화HSC.②탄소묵즙탄서시험감정KC;α-SMA면역세포화학염색법감정HSC.③도치상차현미경하관측세포형태,태반람염색현시세포활성,계수후계산세포적득솔、존활솔화순도.결과 체외성공지동보분리배양료KC화HSC;배양적KC탄서공능명현,이전대HSC α-SMA면역세포화학염색양성자궤호체100%;채용PS혹NS체외동보분리KC적세포득솔화순도균현저고우채용LS분리세포소득(P<0.01),이채용NS체외동보분리간KC적세포존활솔현저고우PS혹LS분리세포적존활솔(P<0.05);분별채용LS、PS화NS동보분리HSC,삼자적세포존활솔축차승고(P<0.05혹P<0.01),이사용LS동보분리적세포수연세포득솔비교고(P<0.05),단기세포순도교사용PS화NS명현강저(P<0.05),PS화NS분리획득적HSC득솔화순도균무명현통계학차이.결론 채용Percoll액화Nycodenz액체외동보분리배양대서간KC화HSC효과호,차후자적세포존활솔최고.