CAJ | 학술논문

背景与目的:人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞株SKOV3及其在裸鼠体内建立的淋巴结定向高转移亚克降第二代SKOV3-pm2、第三代SKOV3-pm3细胞株,为卵巢癌转移分子机制的研究提供了细胞模型.本研究应用飞行时间质谱技术结合蛋白芯片分析筛选卵巢癌淋巴结定向高转移与非定向转移细胞株之间的蛋白质表达差异.方法:采用动物实验测定SKOV3、SKOV3-pm2和SKOV3-pm3三种细胞株的淋巴结转移率.应用表面增强激光解吸离子化-飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption and ionization-time of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术检测各细胞株提取的胞浆总蛋白和分泌蛋白,每种细胞分别采用CM-10型弱阳离子交换芯片和IMAC-3型固定金属亲和芯片检测.应用Ciphergen Protein Software 3.2.0软件和Biomarker Wizard软件对采集3组细胞的蛋白峰进行比较.峰强度相差0.5倍以上者定义为差异蛋白.结果:动物实验显示.细胞株SKOV3及高转移亚克隆SKOV3-pm2、SKOV3-pm3的淋巴结转移率分别为20%、90%和100%,前者与后二者之间的差异有统计学意义(P<0.05).获得CM-10和IMAC3两种蛋白芯片上SKOV3、SKOV3-pm2、SKOV3-pm3细胞株蛋白质谱图谱,对比发现:质荷比(m/z)为6971、7475、9089、9453、10 103、11 655的胞浆蛋白及质荷比(m/z)为4746的分泌蛋白在上述三种细胞株中存在不同程度差异表达.结论:应用SELDI-TOF-MS技术结合固定金属亲和芯片和弱阳离子交换芯片,可有效筛选卵巢癌淋巴结定向高转移特性细胞株中的特异性表达蛋白;寻找到的差异蛋白与淋巴结定向高转移潜能密切相关.
배경여목적:인란소장액성유두상선암세포주SKOV3급기재라서체내건립적림파결정향고전이아극강제이대SKOV3-pm2、제삼대SKOV3-pm3세포주,위란소암전이분자궤제적연구제공료세포모형.본연구응용비행시간질보기술결합단백심편분석사선란소암림파결정향고전이여비정향전이세포주지간적단백질표체차이.방법:채용동물실험측정SKOV3、SKOV3-pm2화SKOV3-pm3삼충세포주적림파결전이솔.응용표면증강격광해흡리자화-비행시간질보(surface-enhanced laser desorption and ionization-time of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)기술검측각세포주제취적포장총단백화분비단백,매충세포분별채용CM-10형약양리자교환심편화IMAC-3형고정금속친화심편검측.응용Ciphergen Protein Software 3.2.0연건화Biomarker Wizard연건대채집3조세포적단백봉진행비교.봉강도상차0.5배이상자정의위차이단백.결과:동물실험현시.세포주SKOV3급고전이아극륭SKOV3-pm2、SKOV3-pm3적림파결전이솔분별위20%、90%화100%,전자여후이자지간적차이유통계학의의(P<0.05).획득CM-10화IMAC3량충단백심편상SKOV3、SKOV3-pm2、SKOV3-pm3세포주단백질보도보,대비발현:질하비(m/z)위6971、7475、9089、9453、10 103、11 655적포장단백급질하비(m/z)위4746적분비단백재상술삼충세포주중존재불동정도차이표체.결론:응용SELDI-TOF-MS기술결합고정금속친화심편화약양리자교환심편,가유효사선란소암림파결정향고전이특성세포주중적특이성표체단백;심조도적차이단백여림파결정향고전이잠능밀절상관.